ارزیابی بیان مارکرهای پرتوانی در کلونی های سلول هایes-like حاصل از اسپرماتوگونی و سلول های بنیادی جنینی
Abstract
هدف:اخیرا ماهیت پرتوانی سلولهای بنیادی اسپرماتوگونی (spermatogonial stem cells, sscs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی es-like cells) (embryonic stem like cells, از sscs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلولها نسبت به سلولهای بنیادی جنینی escs) (embryonic stem cells, است. مواد و روشها: سلولهای اسپرماتوگونی از بیضه موش نوزاد با استفاده از یک روش هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحلهای استخراج شده ودر محیط حاوی dmem و fbs 15 درصد کشت داده شدند. بهطوریکه در پاساژ پنجم کلونی هایes-like cells حاصل شد. بیان ژنهای اختصاصی اسپرماتوگونی stra8،,dazlplzfو ژنهای پرتوانی nanog، sox2، klf4 بهروش rt-pcr، فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی oct4 بهروش ایمونوسیتوشیمی در سلولهایes-like cells بررسی و با سلولهای escs مقایسه شد. نتایج:ماهیتسلولهای es-like cells حاصله توسط معیارهای نظیر مورفولوژی، میزان بالای فعالیت آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی oct4 مورد تایید قرار گرفت. طی تبدیل سلولهای اسپرماتوگونی به سلولهای es-like cells بیان ژنهای اختصاصی نظیر stra8،,dazlplzfکاهش و بیان ژنهای پرتوانی نظیر nanog، sox2، klf4 افزایش مییابد. نتیجهگیری: کشت سلولهای اسپرماتوگونی منجر به تولید کلونیهای es-like cellsمی شود این فرآیند همراه با تغییرات ژنتیکی گستردهای در بیان ژنهای اختصاصی اسپرماتوگونی و ژنهای پرتوانی در سلولهای es-like cells میباشد. در مجموع سلولهای اسپرماتوگونی میتواند دریچهای بهسمت دستیابی به سلولهای پرتوان مورد استفاده قرار گیرد.