جداسازی و شناسایی مولکولی یک acinetobacter sp. مقاوم به آنتی بیوتیک از فاضلاب بیمارستانی و بررسی الگوی پلاسمیدی آن
Abstract
سابقه و هدف: ظهور ژن های مقاوم به عوامل ضد میکروبی و استفاده بی رویه از آنتی بیوتیک ها منجر به انتشار باکتری های مقاوم به چند دارو در محیط می شود. هدف از این مطالعه، جداسازی و شناسایی مولکولی باکتری های مقاوم به آنتی بیوتیک از فاضلاب های بیمارستانی و بررسی نقش پلاسمید در ایجاد مقاومت بود. روش بررسی: در این مطالعه تجربی، مقاومت آنتی بیوتیکی سویه های جدا شده از فاضلاب بیمارستانی با روش دیسک دیفیوژن بررسی شد. شناسایی با روش برگی ((bergey و مطالعات فیلوژنتیک بر مبنای توالی ژن 16s rrna انجام شد. استخراج پلاسمید با روش لیز قلیایی و آزمایش کیورینگ پلاسمید (plasmid curing) با اتیدیوم بروماید انجام شد. یافته ها: 10 سویه از فاضلاب های بیمارستانی جدا شد. در تمام سویه ها مقاومت چند دارویی مشاهده گردید. یکی از سویه ها (st1) نسبت به تمام آنتی بیوتیک های مورد آزمایش مقاوم بود. مطالعات فیلوژنتیک نشان داد که سویه st1 متعلق به جنس acinetobacter بوده و نزدیک ترین خویشاوند آن acinetobacter baumanni iari-v-4 است. سویه فوق acinetobacter sp. hm_c نامیده شد و توالی نوکلئوتیدی آن در genbank ثبت شد. تیمار سویه st1 با اتیدیوم بروماید منجر به حذف پلاسمیدها و در نهایت از دست رفتن مقاومت به آمیکاسین و جنتامایسین شد. نتایج نشان داد که ژن های مقاومت به آمیکاسین و جنتامیسین در این سویه بر روی پلاسمید قرار دارند. نتیجه گیری: فاضلاب بیمارستانی عاملی مهم در انتشار باکتری های مقاوم چند آنتی بیوتیکی و ژن های مقاومت است.