افزایش تولید آنتی بیوتیک کلاولانیکاسید با ایجاد گونه های استرپتومایسس کلاولی جروس تراریخت واجد ژن clar
Abstract(in Persian; no English abstract is available)
مقدمه : کلاولانیکاسید از جمله آنتی بیوتیک های مهار کننده ی β لاکتاماز بوده که توسط استرپتومایسس کلاولی جروس تولید میشود. کلاولانیکاسید در ترکیب با سایر آنتی بیوتیک های قوی و حساس به β لاکتاماز مورد استفاده بالینی قرار میگیرد. ژن calr از جمله ژن هایی بوده که نقش مهمی در تنظیم تولید کلاولانیکاسید ایفا نموده و به منظور بیان ژن های اواخر مسیر بیوسنتز کلاولانیکاسید مورد نیاز است. مواد و روشها: کانسترک نوترکیب pmtclar حاوی ژن تنظیمی clar از دانشگاه اصفهان تهیه و به منظور استفاده، از سویه استرپتومایسس لیویدنس با استفاده از روش لیز قلیایی استخراج شد. به منظور انجام ترانسفورماسیون پروتوپلاست از باکتری استرپتومایسس کلاولی جروس تهیه و در مرحله بعد با استفاده از پلی اتیلن گلایکول در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شد. با استفاده از استخراج پلاسمید و انجام pcr ترانسفورماسیون تأیید شد. در نهایت به منظور بررسی نحوه تأثیر ژن clar اضافه شده از روش بایواسی استفاده شد. نتایج: کلونی های گچی حاصل از رشد استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شده بر روی محیط gyme حاوی آنتی بیوتیک مشاهده شد که تأیید انجام ترانسفورماسیون است. از سویه ترانسفورم شده پلاسمید استخراج و ساختار آن توسط ژل الکتروفورز تأیید شد. با استفاده از پلاسمید استخراج شده و پرایمرهای اختصاصی clar واکنش pcr انجام و باند 1334 جفت بازی مشاهده شد. در نهایت با انجام روش بایواسی و مشاهده ی هاله عدم رشد در نمونه ترانسفورم شده و مقایسه آن با نمونه کنترل مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 3/3 برابری تولید کلاولانیکاسید در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس شده است. بحث و نتیجهگیری: در مطالعه حاضر، با انتقال پلاسمید نوترکیب حاوی ژن clar میزان تولید آنتی بیوتیک کلاولانیکاسید تا 5/2 برابر افزایش یافت. با توجه به اهمیت دارویی کلاولانیکاسید ایجاد سویه هایی که توانایی تولید بیشتر کلاولانیکاسید را داشته باشند می توانند به بومی سازی تولید آنتی بیوتیک کلاولانیکاسید با صرفه اقتصادی بیشتر درمقیاس صنعتی کمک شایانی نماید.