بیان ژن m_2 از ویروس آنفلوآنزا تیپ h9n2)a ) بر روی رده سلولی ct26 به کمک وکتور یوکاریوتی pegfp-n1
Abstract
چکیده: همه گـیری آنـفلوآنزا یکی از بزرگترین عوامل تهدید کننده سلامت در انـسان و حیوان به شمار می آید. دو همه گیری بزرگ از سویه های ویروس آنفلوآنزا h5n1 وh1n1 در طول سال های اخیر منجر به توجه بیشتر به ویروس سبب شونده و اجزاء پروتئین های عمده ویروس شده است. در این مطالعه، ما برای بیان پروتئین m2 از ویروس آنفلوآنزا نوع a در لاین سلولیct-26 بوسیله وکتور پلاسمیدی pegfp-n1 تلاش نمودیم و سپس ما شروع به مطالعه پاسخ های ایمونولوژیکی لاین سلولی ct-26 تغییرشکل یافته یا ترانسفورم شده در موش های آزمایشگاهی کردیم. ضمناً سویه واکسینال h9n2 (a/chicken/iran/101/1998) از موسسه تحقیقات سرم سازی و واکسن سازی رازی بدست آمده بود. (rvsri) orf (open reading frame) ژن m2 بوسیله تکنیک مولکولی rt-pcr و با استفاده از آغازگرهایی که شامل دو سایت اختصاصی آندونوکلئازی برشی می باشد، جدا شده بودند. ژنm2 جدا شده در پلاسمید بیان کننده pegfp-n1 کلون شده و پلاسمید فوق با استفاده از لیپوفکتامین 2000 جهت تغییرشکل لاین سلولی ct-26 استفاده شد. لاین سلولی ct-26 باعث ایجاد تومور کولون در موش balb/c می شود که با تغییرشکل و بیان ژن m2 ویروس در این سلول ها،آن ها می توانند جهت بررسی پاسخ های ایمونولوژیکی برعلیه تومور در مایه کوبی انجام شده در موش balb/c استفاده شوند. موش های مایه کوبی شده که حاوی آنتی بادی بر علیه ژن m2 است پس از تزریق داخل صفاقی با لاین سلولیct-26 تغییرشکـل یافته، در موش تومور کولون ایجـاد نشده یا در صورت ایجاد تومور اندازه آن از حالت طبیعی کوچکتر است.