ارزیابی روش ایمنوبلات در تشخیص عفونت تحت بالینی ناشی از توکسوپلاسما گوندئی در گربه
Abstract
هدف از این مطالعه، بررسی حضور پادتن های ایجاد شده در گربه ها، متعاقب عفونت با سویه rh توکسوپلاسما گوندئی با استفاده از روش ایمنوبلات و بررسی کارایی روش ایمنوبلات طراحی شده با استفاده از آنتی ژن خالص سطحی و یا آنتی ژن کامل حاصل از تکی زوآیت این تک یاخته در تشخیص بیماری بود. به این منظور، اقدام به ایجاد عفونت تجربی در گربه های سرم منفی، با استفاده از تکی زوآیت های تکثیر شده در محیط کشت سلول های vero گردید. پس از آن، تکی زوآیت های لیز شده و یا آنتی ژن خالص، ابتدا به ژل پلی اکریل آمید و سپس به کاغذهای pvdf انتقال یافتند. این کاغذها جهت ارزیابی وجود پادتن های igg در گربه های آلوده، مورد استفاده قرار گرفتند. در ایمنوبلات انجام شده با آنتی ژن کامل، خطوط مثبت تست در محدوده حضور آنتی ژن های سطحی، گرانول های متراکم و روپتری ها مشاهده شدند. در ایمنوبلات انجام شده با آنتی ژن خالص سطحی، خطوط مثبت در منطقه مربوط به پروتئین های ?0 کیلودالتونی دیده شدند. خطوط مثبت در گروه کنترل که از محیط کشت حاوی vero cell های بدون تک یاخته دریافت کرده بودند دیده نشد. نتایج مثبت و منفی، با نتایج تست استاندارد ifat در توافق کامل بودند. نتایج این بررسی نشان داد که ایمنوبلات طراحی شده بر مبنای تکی زوآیت های کامل و یا آنتی ژن خالص سطحی، تست های تشخیصی مناسبی جهت تشخیص سرولوژیک پادتن های ضد t. gondii در گربه هایی که به تازگی با این تک یاخته آلوده شده اند می باشند.