قابلیت تکاملی رویان های گوسفندی حاصل از تخمک های منجمد در هم کشتی با رویان های حاصل از تخمک های غیر منجمد
Abstract
با توجه به قابلیت تکاملی ضعیف رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده، در مطالعه ی حاضر قابلیت تکاملی رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده در همکشتی با رویان های حاصل از تخمک های غیر منجمد مورد ارزیابی قرار گرفت. بدین منظور رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده در مجاورت رویان های حاصل از تخمک های غیر منجمد (2 رویان حاصل از تخمک های منجمد شده و 2 رویان حاصل از تخمک های غیر منجمد) در گوده های ایجاد شده در قطره، کشت داده شدند. در دو گروه دیگر نیز رویان های حاصل از تخمک های منجمد و رویان های حاصل از تخمک های غیرمنجمد به صورت جداگانه کشت داده شدند. طبق نتایج حاصله میزان تسهیم (cleavage) در گروه تخمک های غیرمنجمد نسبت به گروه تخمک های منجمد به صورت معنی داری بیشتر بوده لیکن تفاوتی با گروه های هم کشتی نداشته است. همچنین میزان تولید بلاستوسیست در رویان های حاصل از تخمک های منجمد صفر و در رویان های حاصل از تخمک غیرمنجمد 9/27% بوده است (p<0.05). در شرایط هم کشتی علیرغم عدم تولید بلاستوسیست در رویان های حاصل از تخمک های منجمد لیکن میزان تسهیم بطور غیر معنی دار نسبت به رویان حاصل از تخمک های منجمد شده در گروه غیر هم کشتی افزایش یافته است. و لذا می توان نتیجه گرفت که روش هم کشتی در بهبود شرایط بطور نسبی تاثیر گذار بوده است. همچنین در این مطالعه میزان بیان نسبی ژن های e-cad و stat3 در مراحل رویانی 7-2 سلولی، 16-8 سلولی، مورولا و بلاستوسیست در رویان های حاصل از تخمک منجمد و رویان های حاصل از تخمک غیر منجمد با روش real time pcr ارزیابی شد. بر اساس نتایج به دست آمده میزان بیان نسبی e-cad در رویان های حاصل از تخمک غیر منجمد بیشتر از میزان بیان در رویان های حاصل از تخمک های منجمد بوده و این افزایش در مرحله بلاستوسیست معنی دار (p<0.05) بود. و میزان بیان stat3 در رویان های حاصل از تخمک های منجمد شده بیشتر بوده که این افزایش در مرحله ی 8-2 سلولی و مورولا از نظر آماری معنی دار (p<0.05) بوده است. می توان نتیجه گرفت که انجماد سبب کاهش میزان بیان نسبی e-cad و افزایش میزان بیان نسبیstat3 با توجه به نقش آن در القای بیان ژن های آنتی آپوپتوز و فعال شدن روند آپوپتوز به دنبال انجماد می شود.