ViraScience.
Thesis

اثر هم افزایی پروتئین oprf از pseudomonas aeruginosa و ادجوانت ltb در ایمنی زایی

حسن حیدری فارسانی

Abstract

pseudomonas aeruginosa عامل عفونت های مختلفی مانند عفونت های مجاری ادراری، عفونت های مربوط به زخم و سوختگی، عفونت های قرنیه چشم و مجاری تنفسی تحتانی می باشد. پروتئین oprf در باکتری p. aeruginosa یک پروتئین سطحی بزرگ غشا خارجی می باشد که ازلحاظ خاصیت آنتی ژنی در بین سویه های مختلف حفظ شده است و می تواند به عنوان یک کاندید واکسن امیدبخش باشد. همچنین این موضوع به خوبی اثبات شده است که ltb یک تعدیل کننده ایمنی قدرتمند با فعالیت ادجوانتی قوی می باشد. هدف اصلی مطالعه اخیر ارزیابی ایمنی زایی پروتئین oprf ترکیب شده با ltb به عنوان یک کاندید واکسن علیه p. aeruginosa می باشد. در ابتدا پروتئین oprf بدون ltb و پروتئین کایمر oprf-ltb در وکتور pet28a(+) همسانه سازی شد. سپس پلاسمید های dna نوترکیب به سلول مستعد e. coli bl21(de3) به عنوان میزبان بیانی انتقال یافت. پروتئین ها بیان شده و سپس استخراج شده و با روش sds-page آنالیز شدند. سپس از طریق کروماتوگرافی میل ترکیبی با کمک ستون ni-nta تخلیص شد و پروتئین ها با روش western blotting تائید شدند. سپس موش های balb/cبا استفاده از پروتئین های oprf و پروتئین کایمر oprf-ltb ایمن شدند و آزمایش الایزا انجام شد.ltb توانست ایمنی زایی oprf را افزایش داد. سپس به منظور ارزیابی ایمنی زایی و حفاظت بخشی این پروتئین ها موش های ایمن شده را سوزانده و با p. aeruginosa مورد چالش قراردادیم. موش های ایمن شده با پروتئین کایمر oprf-ltb ایمنی و حفاظت بخشی بیشتری نسبت به موش های ایمن شده با پروتئین oprf بدون ltb از خود نشان دادند بطوری که درصد زنده مانی موش های ایمن با پروتئین های oprf و oprf-ltb به ترتیب 50% و75% نشان داده شد وهیچ یک از موش های غیر ایمن زنده نماندند (p<0.001).همچنین پس از تشریح موش های ایمن با پروتئین های oprf و oprf-ltb و غیر ایمن کاهش در تعداد باکتری ها در کبد وطحال این موش ها نسبت به موش های غیر ایمن مشاهده شد (p<0.001) .علاوه بر این ایمنی زایی غیرفعال (passive) توانست باعث خنثی سازی بیماری زایی این یاکتری شود. بطوریکه این نتایج اثبات می کند که قابلیت oprf-ltb می تواند به عنوان یک کاندید واکسن برای مقابله با عفونتهای p. aeruginosa پیشنهاد شود.

Supervisors and advisors

میرلطیف موسوی گرگری، ایرج رسولی، شهرام نظریان

Similar items

  • ارزیابی چند سیستم ادجوانت جدید برای ایجاد پاسخ ایمنی همورال و سلولی در ایمنی زایی با پروتئین کپسید ویروس هپاتیت c

    Articleفیضمحمد رضا آقاصادقی، mohammad reza aghasadeghi سید مهدی سادات، sayyed mahdi sadat گلنار بهرامعلی، golnar bahramali سهیلا حکمت

    سابقه و هدف: عفونت ویروس هپاتیت c همانند hiv یکی از معضلات عمده بهداشت جهانی است، از این رو مطالعه برای تولید واکسن بر علیه ویروس هپاتیت hcv ) c ) یکی از موضوعات بسیار مهم تحقیقاتی می­باشد. واکسن تهیه شده باید پاسخ­های سلولی و هومورل قوی را در مقابل آنتی ژن­های hcv ایجاد نماید. ل

  • ارزیابی ایمنی زایی توالی تکرار سه تایی ناحیه خارج سلولی پروتئین m۲ ویروس آنفلوانزا همراه با ادجوانت در مدل موش بالب سی

    Articleمجله دانشگاه علوم پزشکی اراکحدیثه شکوهی، hadiseh shokouhi department of microbiology, qom branch, islamic azad university,qom, iran.گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران. محمدرضا ذوالفقاری، mohammad reza zolfaghari department of microbiology, qom branch, islamic azad university, qom, iran.گروه میکروبیولوژی، دانشگاه آزاد اسلامی، واحد قم، قم، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (islamic azad university of ghom) بهرخ فرهمند، behrokh farahmand influenza research laboratory, pasteur institute of iran, tehran, iran.آزمایشگاه تحقیقات آنفلوانزا، انستیتو پاستور ایران، تهران، ایران.سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه آزاد اسلامی قم (islamic azad university of ghom) منصوره طباطبائیان

    زمینه و هدف: ویروس های آنفلوانزا یکی از مهم ترین عوامل بروز عفونت های تنفسی می باشند که باعث بیماری و مرگ و میر بسیار در طی اپیدمی های سالیانه می گردند. پروتئین m2 در سطح ذره ویروس آنفلوانزا، ورود ویروس به سلول های میزبان را تسهیل می کند. بخش خارج سلولی این پروتئین که واجد 24 اسی

  • ارزیابی چند سیستم ادجوانت جدید برای ایجاد پاسخ ایمنی همورال و سلولی در ایمنی زایی با پروتئین کپسید ویروس هپاتیت C

    Article2010فیضآقاصادقی, محمد رضا، بهرامعلی, گلنار، حکمت, سهیلا، روحوند, فرزین

    سابقه و هدف: عفونت ویروس هپاتیت C همانند HIV یکی از معضلات عمده بهداشت جهانی است، از این رو مطالعه برای تولید واکسن بر علیه ویروس هپاتیت HCV ) C ) یکی از موضوعات بسیار مهم تحقیقاتی می­باشد. واکسن تهیه شده باید پاسخ­های سلولی و هومورل قوی را در مقابل آنتی ژن­های HCV ایجاد نماید. ل

  • تولید پروتئین ترکیبی ltb, sth toxoid, cfab, cssa, cssb از باکتری etec در سیستم پروکاریوتی و ارزیابی اثرات ایمنی زایی آن در مدل حیوانی

    Thesis2013وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناورینرگس زینال زاده

    باکتری enterotoxigenic escherichia coli مهمترین عامل اسهال مسافران و یکی از شایعترین عوامل اسهال در کودکان زیر 5 سال در کشورهای درحال توسعه می باشد. مهمترین عوامل بیماریزایی این باکتری، فاکتورهای کلونیزه کننده و سموم روده ای lt و st می باشند. تا کنون واکسنهای متعددی برای پیشگیری