بهینه‌سازی بیان سازه پلی‌توپیک حاوی ژن‌های E6 و E7 ویروس پاپیلومای انسانی در میزبان بیانی اشرشیاکلی

Authors

  • آرش‌کیا, آرش گروه ویروس‌شناسی، انستیتو پاستور ایران
  • رحیمی, آرین گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد ارومیه،
  • رحیمی, رقیه گروه ایمونولوژی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران
  • شاندیز, سیدعطا‌اله سادات گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد علوم و تحقیقات
  • میرزایی, امیر باشگاه پژوهشگران جوان و نخبگان، واحد تهران شرق، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران
  • نوربازرگان, حسن گروه بیوتکنولوژی، دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی
Abstract:

Background: Human papilloma virus is a DNA virus from the papillomavirus family that is most prevalent in human cervical cancers and many studies showed the E6 and E7 proteins are present in the majority of cervical cancer cases. Development of universal HPV peptide-based vaccine with more serotypes coverage has considerable value. The aim of the study was to design a multi-epitope universal vaccine for major HPV based on E6 and E7 proteins and optimization the expression of polytopic construct contains E6 and E7 genes from different genotypes of human papilloma virus as a candid vaccine. Methods: In this experimental study that was carried out in Pasteur Institute of Iran, Virology Department from October 2013 to November 2014. In order to design the polytypic construct, we predicted the most probable immunogenic epitopes of E6 and E7 from common high risk HPV16, 18, 31, 45 along with high prevalent type 6 and 11 using bioinformatics methods. The synthetic pET28a expression vector harboring E6 and E7 protein was transformed into Escherichia coli hosts and its expression was analyzed by SDS-PAGE and western blotting. Finally, in order to expression optimization of recombinant protein, cell density, induction time, growth temperature, IPTG (Isopropyl ;beta-D-1-thiogalactopyranoside) concentration and cultures media were studied. Results: In the present study the recombinant fusion protein was expressed successfully and the highest expression of target protein was achieved in super broth medium containing 0.1% glucose and 0.2% L-arabinose. In Super broth medium, the optimum condition for recombinant protein expression was occurred at OD600 of 0.8, 0.1mM IPTG, one hour’s incubation time at 37 °C and BL21 (A1) host. Conclusion: The results of this study show that the optimum expression of E6 and E7 proteins from different genotypes of human papilloma virus can be performed. Moreover, by purification of recombinant protein and evaluation of its immunogenicity in mice, it can be used as a vaccine candidate against the human papilloma virus.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

بهینه سازی بیان سازه پلی توپیک حاوی ژن های e۶ و e۷ ویروس پاپیلومای انسانی در میزبان بیانی اشرشیاکلی

زمینه و هدف: ویروس پاپیلومای انسانی (hpv) یکی از شایع ترین ویروس هایی است که در ایجاد سرطان دهانه رحم نقش دارد و پژوهش ها نشان داده است که در بیشتر موارد سرطان دهانه رحم، پروتیین های e6 و e7 ویروس پاپیلوما وجود دارد. هدف از مطالعه کنونی بهینه سازی بیان سازه پلی توپیک حاوی ژن های e6 و e7 ژنوتیپ های مختلف ویروس پاپیلومای انسانی به عنوان کاندیدای واکسن بود. روش بررسی: این مطالعه تجربی از مهر 1392 ...

full text

کلونینگ و بیان ژن اینترفرون آلفاb2ی انسانی در سیستم بیانی اشرشیاکلی

زمینه و هدف: اینترفرون‌ها وسیلة دفاعی بدن علیه ویروس‌ها هستند که به سرعت در بدن تولید شده، سلول­های اطراف را به تولید پروتئین‌هایی که تکثیر ویروس را مهار، یا پاسخ ایمنی و رشد سلولی را کنترل می‌کنند، تحریک می‌کنند. با ‌توجه به اهمیت دارویی اینترفرون آلفا b2 انسانی در ایران و جهان، تولید این دارو در داخل کشور و از طریق بیوشیمیایی امکان‌پذیر اما بسیار مشکل می‌باشد. زیرا تولید این ...

full text

طراحی و ساخت یک سازه ژنی نوترکیب بیان کننده پروتئین p24 ویروس لکوز گاوی در اشرشیاکلی

لکوز انزئوتیک گاوی(EBL) یک بیماری رتروویروسی است که بوسیله ویروس لکوز گاوی (BLV) ایجاد و عموماً در دامداری‏های صنعتی مشاهده می‏شود. این بیماری موجب کاهش توان تولید و بروز خسارت‏‏های اقتصادی قابل توجه در گله می‏شود. کنترل عفونت‏های ناشی از BLV با انجام آزمایش‏های سرولوژی، شناسایی و جداسازی یا حذف حیوانات سرم مثبت انجام می‏گردد. در این مطالعه، ژن پروتئین p24 از BLV پس از تکثیر توسط PCR، به پلاسمید...

full text

بررسی حضور ژنوتیپ 16 ویروس پاپیلومای انسانی و ژن پروتئین e7 در ضایعات سرطان سرویکس

سرطان سرویکس به عنوان یکی از بدخیمی های رایج دستگاه تناسلی زنان است و درصد بالایی از زنان در کشورهای در حال پیشرفت به آن مبتلا هستند. ویروس های پاپیلومای انسانی پر خطر مخصوصا نوع 16 ، با تولید انکوپروتئین های e6 و e7 قادر به سرطانی کردن سلول های ناحیه دهانه رحم هستند. ویروس پاپیلومای انسانی وقتی با عوامل خطر دیگری از جمله مصرف دخانیات، مصرف قرص های ضد بارداری، ازدواج در سنین پایین و ... همراه ب...

15 صفحه اول

عفونت های تناسلی ویروس پاپیلومای انسانی در زنان

ویروس پاپیلومای انسانی (HPV) از طریق تماس جنسی در دستگاه تناسلی زنان جایگزین شده و موجب تغییرات بافتی و بروز علایم و شکایات می گردد. تظاهرات بالینی ممکن است به صورت کوندیلومااکومیناتا باشد. همچنین ضایعات پیش بدخیمی در قسمت های مختلف دستگاه تناسلی زنان توسط HPV ایجاد می شود. امروزه به طور قطع HPV را علت مشخص سرطان های گردن رحم می دانند. روش های تشخیصی دقیق در مراحل تحت بالینی بر پایه ارزیابی DNA...

full text

افزایش القای پاسخ Th1 و Th2 در اثر تلقیح DNA کد کننده آنتی ژن E7 ویروس پاپیلومای انسانی تیپ 16 در مدل موش توموری

Background and Objectives: Human papilloma virus (HPV) is known as the etiologic agent of cervical cancer and second common cancer among women. HPV viruses with the elevated risk of infection have more potentiality to cause cancer. The carcinogenesis in these viruses is accomplished by oncoproteins such as E7. Employing DNA vaccines which code specific antigens such as E7 is a novel therapeutic...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 73  issue None

pages  624- 631

publication date 2015-12

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023