بکارگیری تکنیک Multiplex PCR جهت جداسازی همزمان ژنهای ctxA ، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله شده از بیماران

زمینه و اهداف: سویه‌های سم‌زای(Toxogenic) ویبریوکلرا که واجد ژن‌های ctxA،ctxB و zot هستند، نسبت به سویه‌های غیرسم‌زابیماری شدیدتری ایجاد می‌کنند، بنابراین شناسائی دقیق و سریع سویه‌های سم‌زا بسیار حائز اهمیت است. این مطالعه با هدف به‌کارگیری روش Multiplex PCR برای جداسازی هم‌زمان ژن‌های ctxA ، ctxB و zot در ویبریو کلرا ایزوله‌شده از بیماران طراحی گردید. مواد و روش کار: در این مطالعه 73 سویه بالینی جمع‌آوری و با آزمایش‌های سرم‌شناختی و زیست‌شیمیایی به‌عنوان ویبریوکلرای O1 تشخیص داده شدند. در نهایت به‌منظور شناسایی ژن های ctxA ، ctxB وzot از روش Multiplex PCR استفاده شد و سپس نتایج حاصل با نرم‌افزار آماری SPSS16 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. یافته‌ها: برطبق نتایج حاصل از Multiplex PCR، فراوانی ctxA ، ctxB و zot به ترتیب (66 نمونه) 90.4 %، (66 نمونه) 90.4 % و(67 نمونه) 91.7 % بود. نتایج ما نشان داد که Multiplex PCR روشی سریع و دقیق برای جداسازی ویبریوکلرا سم‌زا در نمونه‌های بالینی است. هم‌چنین حساسیت این روش برای جداسازی سویه‌های ویبریوکلرا که واجد ژن‌های ctxA ، ctxB وzot هستند، کمتر از 10 کپی ژن مورد نظر در نمونه است. نتیجه‌گیری: در صورتی‌که پرایمرهای اختصاصی ( ژن‌های هدف ctxA ، ctxB وzot ) برای تشخیص ویبریوکلرا سم‌زا به‌کار برده شود، روش Multiplex PCR یک روش ساده، راحت و نسبتاً ارزان برای جداسازی سریع و دقیق ویبریوکلرا سم‌زا در نمونه‌های کلینیکی است.