ساخت کتابخانه ژنی آنتیبادی ScFv انسانی بر پایه T Vector علیه توکسین کزاز
Authors
Abstract:
سابقه و هدف: امروزه آنتی‌بادی‌ها در حوزه‌های تشخیص و درمان جایگاه ویژه‌ای را به خود اختصاص داده‌اند. در این میان، آنتی‌بادی‌های مونوکلونال کاملاً انسانی به دلیل عدم برانگیختن پاسخ ایمنی در بدن و کارایی بالا در درمان بیماری‌ها مورد توجه قرار‌گرفته‌اند. تحقیق پیش‌رو بهمنظور ساخت کتابخانه ژنی آنتیبادی نوترکیب انسانی از یک فرد واکسینه با توکسوئید کزاز انجام گرفته است. مواد و روش‌ها: ابتدا از فرد ایمن با توکسوئید کزاز خون گرفته شد. سپس لنفوسیت‌ها جدا و RNA از آن ها استخراج گردید. همه تنوع ژن‌های ناحیه متغیر زنجیره‌های سبک و سنگین آنتیبادی به روش RT-PCR تکثیر و به صورت ScFv به یکدیگر متصل شدند. سپس این قطعات به داخلT vector الحاق و به باکتریE. coli DH5α انتقال یافتند. پس از آن، الایزا صورت گرفت. جهت تأیید کتابخانه ژنی آنتیبادی، پلاسمید آن استخراج و توالی‌یابی انجام شد. یافته ها: کیفیت cDNA با انجام واکنش توسط پرایمرهای ژن HPRT تأیید شد. صحت انجام مراحل PCR و کلونینگ، توسط الکتروفورز ژل آگارز و برش آنزیمی مورد تأیید قرار‌گرفت. باکتری‌های حاوی پلاسمید نوترکیب با رشد روی محیط کشت بر اساس رنگ آبی و سفید، مشخص شدند. از کلون‌ها پلاسمید استخراج و توالی‌یابی انجام شد. نتایج حاصل از تشابه توالی‌ها در پایگاه داده ی igblast نشان داد که این توالی‌ها مربوط به ژن آنتیبادی انسانی می‌باشند. هم چنین توسط الایزا تأیید این که آنتی بادی اختصاصی توکسین کزاز می باشد، صورت گرفت. نتیجه گیری: در این تحقیق کتابخانه آنتیبادی انسانی از فرد ایمن با توکسوئید کزاز، ساخته شد. سپس، ژن آنتی بادی موجود در این کتابخانه توسط توالی یابی و هم ترازی در پایگاه NCBIمورد تأیید قرار گرفت و الایزا اختصاصیت این آنتی بادی ها را مشخص نمود. در ادامه جهت یافتن ژن آنتیبادی اختصاصی توکسین‌کزاز در این کتابخانه، لازم است غربال گری به روش نمایش فاژی انجام شود.
similar resources
ساخت کتابخانه ژنی آنتی بادی scfv انسانی بر پایه t vector علیه توکسین کزاز
سابقه و هدف: امروزه آنتی بادی ها در حوزه های تشخیص و درمان جایگاه ویژه ای را به خود اختصاص داده اند. در این میان، آنتی بادی های مونوکلونال کاملاً انسانی به دلیل عدم برانگیختن پاسخ ایمنی در بدن و کارایی بالا در درمان بیماری ها مورد توجه قرار گرفته اند. تحقیق پیش رو به منظور ساخت کتابخانه ژنی آنتی بادی نوترکیب انسانی از یک فرد واکسینه با توکسوئید کزاز انجام گرفته است. مواد و روش ها: ابتدا از فرد ا...
full textغنیسازی کتابخانه ژنی نانوبادی علیه پروتئین سطحی ویروس پاپیلومای انسانی عامل سرطان دهانه رحم
Background and Objective: The human papillomavirus (HPV) is the main cause of cervical cancer. The symptoms of the disease are non-specific and it can be transferred from one person to another one. In order to prevent the spread of HPV virus and reducing mortality rate of cervical cancer, early detection programs are needed. Accurate and highly sensitive test is essential for screening examinat...
full textغنی سازی کتابخانه ژنی نانوبادی علیه پروتئین سطحی ویروس پاپیلومای انسانی عامل سرطان دهانه رحم
مقدمه و هدف: ویروس پاپیلومای انسانی، عامل اصلی سرطان دهانه رحم است و بهراحتی از فردی به فرد دیگر منتقل میشود. برای جلوگیری از انتشار این ویروس، نیاز به تشخیص زودهنگام و حساس سرطان دهانه رحم بهخوبی احساس میشود. هدف از این مطالعه، غنیسازی کتابخانه فاژی بهمنظور جداسازی نانوبادیهای اختصاصی علیه پروتئین 1l ویروس پاپیلومای انسانی است. از این نانوبادیها میتوان در کیتهای تشخیصی با حساسیت بال...
full textالقای ایمنی هترولوگ علیه سویه‌های رایج آنفلوانزا با استفاده از واکسن ژنی بر پایه قطعه HA2
Background: Problems of live and inactivated influenza vaccines such as, increasing emerge and re-emerge viruses with high human mortality, current epidemics of influenza and direct transmission of avian viruses to human, affect the vaccination program. DNA vaccines as third generation of vaccines is specially considered for control of influenza in human and poultry. The main advantage of these...
full textطراحی و ساخت سازه ژنی کدکننده فاکتوررشد فیبروبلاستی-۲ متصل به بخش ایمونودامیننت توکسین سودوموناس آئروژینوزا
چکیده زمینه و هدف: توقف رگ زایی تومور، رشد سلول های توموری را به طور قابل ملاحظه ای کاهش می دهد. در این میان پروتئین فاکتور رشد فیبروبلاست- 2 (bfgf) به عنوان یک فاکتور رگ زایی مهم هدف مناسبی در مهار رگ زایی تومور و درمان سرطان است. هدف این مطالعه طراحی، ارزیابی و ساخت سازه ژنی نوترکیب در جهت بیان کارامد فیوژن پروتئینی است که دارای بخش های ایمونودامیننت توکسین سودوموناس همراه با bfgf است. روش بر...
full textساخت گیرنده کایمریک لنفوسیت T دارای کمک محرک OX40 علیه سلول‌های سرطان سینه
Background and Objective: Chimeric antigen T cell receptors provide a good approach for adoptive immunotherapy of cancer. In this new kind of chimeric T cell receptor, nanobodies are replaced as variable fragment of T cell receptor. Nanobodies (VHH) are the smallest fragments of antibodies that have great homology to human VH and low immunogenic potential. VHH-hing-CD28-CD3و construct was made ...
full textMy Resources
Journal title
volume 5 issue None
pages 1- 7
publication date 2015-03
By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.
No Keywords
Hosted on Doprax cloud platform doprax.com
copyright © 2015-2023