ViraScience.
Thesis

تهیه ی کانژوگه پراکسیداز آنتی بادی مونوکلونال ضد igg مرغ و ارزیابی آن به وسیله الیزا

ندا مهرآور

Abstract

میکروارگانیسم های بیماری زا از عوامل اصلی تلفات و خسارت های اقتصادی در صنعت طیور هستند. به دلیل تأثیر این عوامل بر صنعت طیور کیت های آزمایشگاهی مختلفی بر پایه الیزا برای تشخیص عفونت های حاصل از این عوامل طراحی شده اند. در این کیت ها اغلب از یک آنتی بادی ثانویه ی کانژوگه شده با آنزیم به منظور شناسایی igg مرغ استفاده می شود. هدف از مطالعه ی حاضر نشان دار کردن یک آنتی بادی مونوکلونال ضد igg مرغ با آنزیم پراکسیداز و ارزیابی آن در الیزای غیر مستقیم به عنوان آنتی بادی ثانویه می باشد. برای این منظور یک تیره سلول هیبریدومای تولید کننده ی آنتی بادی مونوکلونال (5b8) ضد igg مرغ در محیط rpmi 1640 کشت داده شده و مایع روی سلول ها جهت خالص سازی آنتی بادی 5b8 جمع آوری گردید. خالص سازی این آنتی-بادی از محیط کشت با استفاده از یک ستون حاوی سفارز حساس شده با igg مرغ انجام شد. برای آماده کردن این ستون ابتدا igg مرغ با استفاده از اسیدکاپریلیک و سولفات آمونیوم خالص سازی و نتیجه خالص سازی با استفاده از sds- page بررسی شد. سپس طبق روش های استاندارد igg خالص شده مرغ به رزین سفارز فعال شده با سیانور بروهیدرید اتصال داده شد. پس از خالص سازی آنتی بادی 5b8 با ستون سفارز، واکنش آنتی بادی خالص شده با igg مرغ در الیزای غیرمستقیم بررسی شد. براساس نتایج به دست آمده آنتی بادی مونوکلونال خالص شده تا رقت 204800/1 قادر به شناسایی igg مرغ با غلظت یک میکروگرم در حفره بود. پس از اطمینان از عملکرد آنتی بادی و نیز بررسی عاری بودن آن از آلودگی با igg مرغ (با آزمایش ایمونودات) واکنش کانژوگاسیون با آنزیم پراکسیدار به وسیله پریودات سدیم انجام گردید. عملکرد کانژوگه تهیه شده برای شناسایی igg مرغ در الیزای مستقیم مورد آزمایش قرار گرفت. نتایج نشان داد که کانژوگه تهیه شده تا رقت 32000/1 قادر به شناسایی igg مرغ با غلظت یک میکروگرم درحفره بود. در نهایت، توانایی کانژوگه ی پراکسیداز تجاری و تهیه شده برای شناسایی آنتی بادی های ضد نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوآنزا در سرم مرغ های آلوده به ویروس آنفلوآنزا بررسی شد. od بدست آمده از آزمایش انتهایی همبستگی قوی و معناداری (r =0.95 ,p<0.001) را بین کانژوگه ی تجاری و تهیه شده نشان داد. در نتیجه از کانژوگه ی تهیه شده می توان برای طراحی کیت های تشخیصی سرم شناسی طیور استفاده نمود.

Supervisors and advisors

مسعود رضا سیفی آباد شاپوری، حسین معتمدی

Similar items

  • اندازه گیری ثابت تمایل (افینیتی) آنتی بادی مونوکلونال igg ضد آنزیم الکالین فسفاتاز با استفاده از روش الیزا

    Articleمجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجندناصری محسن، بیرجند، خیابان غفاری، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، بخش ایمونولوژی موذنی سیدمحمد، پورفتح اله علی اکبر، مصباح زاده بهزاد

    زمینه و هدف: افینیتی آنتی بادی به آنتی ژن در بسیاری از موارد تاثیر بیولوژیکی مهمی در فعالیت آن آنتی بادی و همچنین در انجام سنجشهای آزمایشگاهی ایمونولوژیکی مانند رادیوایمونواسی (ria) و ایمونوهیستوشیمی دارد. مطالعه حاضر با هدف سنجش افینیتی آنتی بادی مونوکلونال محصول کلون هیبریدومای

  • اندازه گیری ثابت تمایل (افینیتی) آنتی بادی مونوکلونال IgG ضد آنزیم الکالین فسفاتاز با استفاده از روش الیزا

    Article2004مجله علمی دانشگاه علوم پزشکی بیرجندمصباح زاده, بهزاد، موذنی, سیدمحمد، ناصری, محسن، پورفتح اله, علی اکبر

    Background and Aim: The affinity of an antibody with its antigen is a crucial parameter in its biological activity and carrying out immunologic tests such as radioimmunoassay (RIA) and immunohistochemistry. This study was done in our laboratory at Tarbiat Modarres University to m

  • تهیه و ارزیابی ویژگیهای نانوذرات پلی لاکتیک-کو-گلیکولیک اسید حامل داروی Linrodostat mesylate تزیین شده با آنتی بادی مونوکلونال PDL1

    Article2023زیست فناوریسمیه احمدی افشار، نوروز دلیرژ، ساناز شیخ زاده، رحیم حب نقی

    نانوتکنولوژی اثر مهاری خود بر روی ریزمحیط تومور را عمدتاً از طریق تعدیل مکانیسم سرکوب ایمنی نشان می دهد. موفقیت در این زمینه تا حد زیادی به خصوصیات فیزیکوشیمیایی واکسن های نانوذرات بستگی دارد. هدف از پژوهش حاضر، تولید واکسن نانوذرات نشان دار شده با آنتی بادی منوکلونال ضد PD-L1 حا

  • تولید انبوه آنتی بادی مونوکلونال علیه پپتید خارج سلولی cd۲۰ و ارزیابی اتصال اختصاصی آن به سلول های بیان کننده cd۲۰

    Articleمجله پزشکی ارومیهکوشان سینه سپهر، koushan sineh sepehr department of immunology, faculty of medicine, tabriz university of medical sciencesدانشگاه علوم پزشکی تبریز، دانشکده پزشکی، گروه ایمنی شناسی پزشکی،سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تبریز (tabriz university of medical sciences) بهزاد برادران، behzad baradaran drug applied research center, tabriz university of medical sciences, tabriz, iranمرکز تحقیقات کاربردی دارویی، دانشگاه علوم پزشکی تبریز. تبریز، ایران- تلفن:4113364665سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تبریز (tabriz university of medical sciences) جعفر مجیدی، jafar majidi medical immunology department, immunology research center (irc), tabriz university of medical scienceمرکز تحقیقات ایمونولوژی، داشگاه علوم پزشکی تبریز،سازمان اصلی تایید شده: دانشگاه علوم پزشکی تبریز (tabriz university of medical sciences) جلال عبدالعلی زاده

    پیش زمینه و هدف: امروزه با پیشرفت فنّاوری هیبریدوما در تولید آنتی بادی های مونوکلونال این امکان فراهم شده که به واسطه این مواد، مارکرهای مختلف سلولی در سطح سلول های نرمال و بدخیم ارزیابی گردد. cd20، فسفوپروتئین غیر گلیکوزیله، یک مارکر مناسب در تشخیص لوسمی و لنفوم ها می باشد که تق

  • ارزیابی آنتی بادی های igg و igm علیه ویروس واریسلا زوستر در سرم کودکان مبتلا به لوسمی لنفوبلاستیک حاد

    Articleمجله علمی دانشگاه علوم پزشکی گرگانعلی قاسمی، a ghassemi زهرا بدیعی، z badiee حمید فرهنگی، h farhangi عبدالله بنی هاشم

    زمینه و هدف : ویروس واریسلا زوستر (varicella zoster virus: vzv) عامل یک بیماری خفیف در کودکان است؛ اما در کودکان با نقص در سیستم ایمنی می تواند یک بیماری تهدیدکننده محسوب شود. این مطالعه به منظور ارزیابی آنتی بادی های igg و igm علیه vzv در سرم کودکان مبتلا به لوسمی لنفوبلاستیک حا

  • تهیه و تخلیص آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان از زرده تخم مرغ

    Articlejournal of dental school, shahid beheshti university of medical sciencesمهدی پورامیر، mahdi pouramir faculty of medicine, babol university of medical sciences, babol-iran.دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بابل سلیمان محجوب، soleiman mahjoub faculty of medicine, babol university of medical sciences, babol-iran.دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بابل رمضان رجب نیا، ramezan rajab nia faculty of medicine, babol university of medical sciences, babol-iran.دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بابل

    سابقه و هدف: استرپتوکک موتان سروتیپ c عامل باکتریایی اصلی در پوسیدگی دندانهای انسان است. هدف از تحقیق تولید و خالص سازی آنتی بادی علیه استرپتوکک موتان سروتیپ c از زرده تخم مرغ بود. مواد و روشها: در این تحقیق آزمایشگاهی استرپتوکک موتان m t 8148 (سروتیپc ) بعنوان آنتی ژن استفاده شد