شناسایی باکتریهای خاکزی باغهای انگوراستان قزوین و بررسی اثر بازدارندگی آنها برrhizobium vitis عامل گال طوقه و ریشه

یکی از مهمترین بیماری های انگور در سراسر جهان سرطان گالی طوقه و ریشه با عامل rhizobium vitis می باشد. علی رغم اهمیت بیماری تاکنون روش کنترل شیمیایی موثری برای آن ارائه نشده است اما کنترل آن با برخی باکتری های آنتاگونیست مورد توجه قرار گرفته است. این پروژه با هدف جداسازی و شناسایی باکتری های خاکزی باغهای انگور استان قزوین و بررسی اثر آنتاگونیستی آنها روی rh. vitis صورت گرفت. در این بررسی از مناطق عمده ی پرورش انگور نمونه هایی از ریشه و طوقه انگور به همراه مقداری خاک اطراف آنها تهیه گردید و به آزمایشگاه منتقل شد. جداسازی باکتری از نمونه های جمع آوری شده مطابق روشهای معمول روی محیط های کشت king’s b (kb)، nutrient agar (na) و nas دارای 1% گلوکز انجام گرفت. طی نمونه-برداری از 22 باغ، 210 جدایه جدا گردید. جدایه ها بر اساس خصوصیات مورفولوژیک روی محیط-های کشت و نتایج چند آزمون اولیه به دو گروه تقسیم شدند. در مجموع 73 جدایه برای بررسی اثرات آنتاگونیستی انتخاب شدند. بررسی اثر آنتاگونیستی جدایه ها جهت تولید آنتی بیوتیک روی محیط کشت potato dexterose agar (pda)، سیدروفور روی محیط kb، سیانید هیدروژن و آنزیم پروتئاز انجام شد. در نهایت 19 جدایه برای بررسی جهت شناسایی با آزمون های بیوشیمیایی انتخاب شدند. بر اساس نتایج آزمون های بیوشیمیایی و pcr با پرایمرهای جدایه bacillus subtilis، باکتری های آنتاگونیست متعلق به بیوارهای i، iii و iv از pseudomonas fluorescens، bacillus subtilis و pseudomonas sp.، bacillus sp. شناسایی شدند. ردیابی ژنهای dapg و hcnabc با پرایمرهای اختصاصی، وجود این ژنها را در برخی از جدایه ها اثبات نمود که با نتایج آزمون های تولید این ترکیبات در آزمایشگاه مطابقت داشت. بررسی توانایی جدایه ها در جلوگیری از تشکیل گال توسط عامل بیماریزا روی بافت های گیاهی هویج و شلغم انجام شد. تاثیر چهار جدایه نماینده از جنس های شناسایی شده روی عامل گال طوقه و ریشه در شرایط گلخانه ای صورت گرفت که دو جدایه b. subtilis i7 و p. flourescens e9 در کاهش اندازه گال تشکیل شده در قسمت انتهایی ریشه تا طوقه گوجه فرنگی بیشترین اثر را نشان دادند. این مطالعه برای اولین بار در استان قزوین جهت بررسی؟امکان؟کنترل؟بیولوژیکی rh. vitis انجام؟گرفت.