بررسی حضور ژن hwp1 کاندیدا البیکنس با تکنیکrt-pcr و بررسی نقش آن دراتصال سلولی

کاندیدا آلبیکنس یک قارچ فرصت طلب وشایع ترین عامل پاتوژن قارچی انسان است. ژنهای متعددی ازقبیلhwp1 (پروتئین دیواره سلولی هایفی)درروند پاتوژنیسیته این قارچ موثرند. ژن hwp1،یک عامل شناخته شده ای درکاندیدا آلبیکنس است که این پروتئین دیواره سلولی باعث تشکیل بیوفیلم می شود. در این تحقیق به بررسی حضور ژن hwp1 کاندیدا آلبیکنس در ایزوله های بدست آمده از زنان مبتلا به واژنیت کاندیدیازیس و نقش آن در اتصال سلولی پرداخته ایم. دراین مطالعه تعداد50ایزوله کاندیداآلبیکنس مقاوم به فلوکونازول از بیماران دارای واژنیت مراجعه کننده به کلینیک زنان درتهران جمع آوری شد. استخراج dnaوrna بوسیله ی پرل شیشه ای و بافر لایزیز صورت گرفت و cdna بوسیله ی آنزیم ریورس ترانسکریپتاز سنتز شده و تکنیک rt-pcr جهت بررسی بیان ژن hwp1 استفاده شد. سپس توانایی اتصال ایزوله های دارای بیان وعدم بیان ژن hwp1به سلول های اپی تلیال(hela) توسط آزمون اتصال سلولی بررسی شدونتایج توسط آزمون t-test و آزمون آنالیزواریانس دوطرفه در نرم افزار spss موردبررسی قرارگرفت. نتایج نشان دادکه از50 ایزوله کاندیدا آلبیکنس، (94%) 47 نمونه دارای ژن hwp1را با تکنیک pcr بوده اند. وازبین 47نمونه حاوی ژنhwp1، پس از انجام تکنیک rt-pcr (57%)27 نمونه بیان ژن hwp1رانشان داده اند. نتیجه تست اتصال برروی ایزوله های دارای بیان ژن hwp1 و ایزوله های فاقد بیان ژن hwp1اختلاف معنی داری (p<0.05) را نشان داده است. نتایج در این تحقیق نشان می دهد، تمامی ایزوله های دارای بیان ژن hwp1 میزان بالای اتصال به سلول های اپی تلیال را نشان می دهند در حالیکه ایزوله های فاقد بیان ژن hwp1 میزان اتصال کمتری را نشان می دهند. لذا یک ارتباط مثبت بین بیان ژن hwp1 وتوانایی اتصال به سلول های اپی تلیال وجود دارد.