تشخیص سریع قارچ verticillium dahliae عامل بیماری پژمردگی ورتیسلیومی درختان زیتون با استفاده از فن آوری lamp

پایان نامه
چکیده

بیماری پژمردگی ورتیسلیومی، که توسط قارچ verticillium dahliae ایجاد می¬شود، یکی از مهم¬ترین بیماری¬های زیتون در دنیا می-باشد. روش¬های مولکولی متعددی جهت استخراج dna از قارچ v. dahliae به منظور استفاده از آن¬ها در روش¬های تشخیص مولکولی ارایه شده است که اغلب مبتنی بر pcr هستند. تکنیک lamp روش جدیدی جهت تشخیص بسیاری از عوامل بیماری¬زا به خصوص ویروس¬های آلوده کننده گیاهی می¬باشد که در آن تمام واکنش¬ها، با اختصاصیت و سرعت بالا می¬تواند تحت شرایط هم¬دما انجام شود و نیازی به تجهیزات گران قیمت ندارد. دراین پژوهش از تکنیک lamp برای تشخیص دقیق و سریع قارچ عامل بیماری پژمردگی ورتیسلیومی زیتون استفاده شد. همچنین کارآیی سه روش استخراج dna از میسلیوم قارچ و از بافت چوب برای استفاده در واکنش lamp مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور، dna ژنومی قارچ با استفاده از سه روش: روش ctab، روش سریع استفاده از naoh و روش اصلاح شده استخراج dna از چوب، استخراج شد. بعد از ارزیابی کمی وکیفی dna استخراج شده، واکنش lamp با استفاده از آغازگرهای اختصاصی طراحی شده و dna الگو استخراج شده با سه روش فوق انجام شد و در نهایت با بهینه¬سازی شرایط واکنش، قارچ عامل بیماری شناسایی گردید. در ادامه دقت و حساسیت این تکنیک با روش مبتنی بر nested-pcr مقایسه شد. نتایج نشان داد علی رغم کمیت متفاوت dna، واکنش لمپ حساسیت بالایی در تشخیص اختصاصی قارچ عامل بیماری دارد. به کار گیری روش اصلاح شده استخراج dna از بافت چوب درختان بیمار، بدون نیاز به کشت و خالص¬سازی قارچ عامل بیماری، مدت زمان تشخیص آلودگی درختان به قارچ ورتیسلیوم را به طور چشم¬گیری کاهش داد. همچنین نتایج این پژوهش نشان داد که روش lamp در مقایسه با روش nested-pcr ازسرعت، دقت و حساسیت بیشتری در تشخیص قارچ برخوردار است و می¬تواند روش جایگزین مناسبی برای روش فوق در غربال¬گری درختان آلوده به قارچ در باغات زیتون باشد.

۱۵ صفحه ی اول

برای دانلود 15 صفحه اول باید عضویت طلایی داشته باشید

اگر عضو سایت هستید لطفا وارد حساب کاربری خود شوید

منابع مشابه

تعیین پاتوتیپ‌های قارچ Verticillium dahliae عامل بیماری پژمردگی ورتیسلیومی در باغات زیتون طارم با استفاده از تکنیک Nested-PCR

پژمردگی ورتیسیلیومی یکی از بیماری­های مهم زیتون می­باشد که توسط گونه   Verticillium dahliaeایجاد می شود. عامل بیماری با تخریب آوندها باعث خشکیدگی شاخه­ها، کاهش عملکرد و در نهایت مرگ درختان بیمار می­شود. جدایه­های قارچ عامل بیماری، با وجود تشابه ظاهری، از نظر علایم و شدت بیماری­زایی در دو گروه متمایز تحت عنوان پاتوتیپ­های برگ­ریز (Defoliating) و غیر برگ­ریز (Non-defoliating) دسته بندی می­شوند. ش...

متن کامل

تعیین پاتوتیپ های قارچ verticillium dahliae عامل بیماری پژمردگی ورتیسلیومی در باغات زیتون طارم با استفاده از تکنیک nested-pcr

پژمردگی ورتیسیلیومی یکی از بیماری­های مهم زیتون می­باشد که توسط گونه   verticillium dahliaeایجاد می شود. عامل بیماری با تخریب آوندها باعث خشکیدگی شاخه­ها، کاهش عملکرد و در نهایت مرگ درختان بیمار می­شود. جدایه­های قارچ عامل بیماری، با وجود تشابه ظاهری، از نظر علایم و شدت بیماری­زایی در دو گروه متمایز تحت عنوان پاتوتیپ­های برگ­ریز (defoliating) و غیر برگ­ریز (non-defoliating) دسته بندی می­شوند. ش...

متن کامل

همه‎گیرشناسی بیماری پژمردگی ورتیسیلیومی پنیه: تنوع بیماری‎زایی جدایه‎های قارچ Verticillium dahliae

     به منظور تعیین تنوع عامل بیماری پژمردگی ورتیسیلیومی پنبه، تعداد 95 جدایه قارچ Verticillium dahliae Kleb. از خاک، پنبه، بــادنجـان، بامیه، خیار، پسته، کنجد، گوجه فرنگی و غوزک و ریزوسفر علف‎های هرز داتوره، توق و تاجریزی سیاه جمع‎آوری شدند. خصوصیات بیماری‎زایی، مورفولوژیکی، بهترین دمای رشد و دامنه میزبانی وسازگاری رویشی جدایه‎ها بررسی گردید. نتایج نشان دادکه جدایه‎ها از نظر ایجاد علائم در پنب...

متن کامل

بررسی اثر متقابل نماتد ریشه گرهی Meloidogyne javanica و قارچ عامل پژمردگی ورتیسیلیومی Verticillium dahliae روی نهال‌های برخی از ارقام زیتون

در این تحقیق نمونه‌برداری از قارچ Verticillium dahliae سویه غیر برگریز (SS-4) از باغ‌های آلوده زیتون در ناحیه توشن واقع در جنوب شهر گرگان انجام گرفت. نماتد ریشه گرهی، Meloidogyne javanica، از نهال‌های زیتون آلوده جداسازی شده و بعد از شناسایی گونه، نماتد روی نشاءهای گوجه‌فرنگی رقم روتگرز تکثیر گردید. در این آزمایش نهال‌های یکساله زیتون رقم زرد، روغنی، کرونیکی (مقاوم به ورتیسیلیوز) و مانزانیلا (...

متن کامل

برهمکنش درون‌زیوه‌ای Verticillium dahliae، عامل پژمردگی ورتیسیلیومی پسته با Acremonium kiliense

مطالعه حاضر برای دست‌یابی به شیوه‌ای سازگار با محیط زیست برای مدیریت این بیماری انجام گرفت. به منظور مطالعه برهمکنشِ Verticillium dahliae عامل پژمردگی آوندی پسته وAcremonium kiliense ، قارچ درون‌رُست جدا شده از پسته، از نهال‌های نه ماهه سه رقمِ پسته سرخس، بادامی ریز زرند و قزوینی استفاده شد. مایه‌زنی A. kiliense به ارقام مذکور توسط سوسپانسیون کنیدیوم‌ها به غلظتِ 106<...

متن کامل

منابع من

با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید

ذخیره در منابع من قبلا به منابع من ذحیره شده

{@ msg_add @}


نوع سند: پایان نامه

دانشگاه بین المللی امام خمینی (ره) - قزوین - پژوهشکده فنی و مهندسی

میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com

copyright © 2015-2023