ساخت مینی ژنوم ویروس سرخک بر اساس تکنولوژی ژنتیک معکوس

در دهه های اخیر، روش ژنتیک معکوس به طور گسترده برای رها سازی ویروس های rna دار زنجیره منفی از مولکول cdna یا رهایی مینی ژنوم های ویروسی استفاده شده است. این تکنیک برای مطالعه مراحل مختلف تکثیر ویروس و واکنش های متقابل ویروس با میزبان بکار گرفته شده است. ژنتیک معکوس همچنین می تواند برای طراحی واکسن های جدید مورد استفاده قرار گیرد. در مورد رهایی ویروس های rna دار زنجیره منفی فعالیت آنزیم t7 rna polymerase بعلاوه پروتئین های ویروس شامل نوکلئوپروتئین (n)، فسفوپروتئین (p) و پلیمراز (l) برای رهایی ویروس و یا مینی زنوم ویروس ضروری هستند. ویروس سرخک یک ویروس rna دار زنجیره منفی است که ژنوم و نیز مینی ژنوم آن از مولکول cdna آنتی ژنومی ویروس سرخک رها شده است.اهداف: در این پژوهش، ما ساخت یک رده سلول کمکی را برای رهایی مینی ژنوم ویروس سرخک طراحی کردیم. این رده سلول کمکی بطور پایدار آنزیم t7 rna polymerase بعلاوه پروتئین های n و p ویروس سرخک را از طریق مولکول mrna سه سیسترونی بیان می کند.مواد وروش کار: برای رهایی مینی ژنوم ویروس سرخک سلول کمکی پایدار توسط وکتور بیانی سه سیسترونی ساخته شد که آنزیم t7 rna polymerase بعلاوه پروتئین های n و p ویروس سرخک را بیان می کرد. برای ساخت وکتور سه سیسترونی ژن t7 rna polymerase بعد از پروموتر cmv کلون شد و پروتئین های n و p تحت کنترل توالی ires (محل ورود ریبوزوم داخلی) کلون شدند.نتایج: نتایج ما دلالت بر این دارند که مینی ژنوم ویروس سرخک می تواند در این رده سلول کمکی بعد از ترنسفکشن همزمان با پلاسمید حاوی ژن پلیمراز l ویروس سرخک رها شود.بحث: توسط این سیستم مینی ژنوم ویروس سرخک رهایی یافت. مطالعات بیشتری برای بهبودی کارایی رهایی مینی ژنوم ویروس سرخک ضروری است. این احتمالا از طریق ترنسفکت همزمان مینی ژنوم ویروس سرخک همراه با وکتور سه سیسترونی و پلاسمید حاوی ژن پلیمراز ویروس سرخک امکان پذیر است.