بررسی رشد و تمایز سلول های بنیادی با منشا بند ناف انسانی بر روی داربست پلیمری متخلخل حاوی نانو ذرات

مهندسی بافت استخوان ترکیبی از سلول و داربست سه بعدی جهت ترمیم بافت آسیب¬دیده یا از بین رفته¬ی استخوانی است. در این پایان¬نامه نانوداربست پلیمری pla با روش solvent casting/salt leaching و با استفاده از پروژن (نمک nacl) ساخته شد داربست متخلخل تهیه شده، از لحاظ خصوصیات سطحی، درصد تخلخل، اندازه¬ی منافذ، توزیع منافذ و تخریب¬پذیری بررسی گردید مطالعات میکروسکوپ الکترونی نگاره نشان¬دهنده¬ی خصوصیات مناسب سطحی داربست بود، تخلخل¬سنجی بر اساس قانون ارشمیدس انجام گرفت بررسی زیست سازگاری داربست با استفاده از آزمون mtt نشان داد که داربست سطوح بهتری را برای رشد و تکثیر سلول¬ها فراهم می¬نماید سلول¬های بنیادی مزانشیمی از بند ناف جنین انسانی استخراج شد و به¬منظور ااثبات بنیادی بودن سلول¬های جدا شده از بند ناف از روش فلوسایتومتری استفاده شد که نشان دهنده¬ی بیان بالای 90% مارکرها¬ی cd105 , cd90 و عدم بیان مارکر خون¬ساز cd45 در سطح سلول¬ها بود. سلول¬های بنیادی مزانشیمی بند ناف روی داربست کشت داده¬شد و از لحاظ مورفولوژیکی و نحوه¬ی اتصال سلول روی داربست به¬وسیله¬ی تصاویر میکروسکوپ الکترونی نگاره مورد بررسی قرار گرفت و برای بررسی توان تمایزی سلول¬ها روی داربست بعد از کشت به مدت 21 روز تحت تیمار محیط تمایزی استئوژنیک قرار گرفت تمایز سلولی در روز 21 با رنگ¬آمیزی آلیزارین قرمز و ون¬کوسا بررسی شد که هر دو نوع رنگ¬آمیزی رسوب کلسیم بر روی داربست را نشان داد و در نهایت، تصاویر میکروسکوپ الکترونی نگاره رسوب کلسیم را در داربست حاوی سلول¬های تمایز یافته به استئوبلاست تأیید کرد.