ارزیابی پاسخ های ایمنی همورال و سلولی برعلیه واکسن یونیورسال کاندید ویروس پاپیلومای تیپ های 6، 11، 16، 18، 31 و 45 در مدل موش آزمایشگاهی

پاپیلوماویروسها، ویروسهایdna دار دو رشته ای فاقد پوشش هستند که در خانواده پاپیلوماویریده طبقه بندی می شوند. بیش از 40 گونه ژنوتیپی این ویروسها، عفونت زا هستند و از آن میان حدود 15 ژنوتیپ، کارسینوژن هستند که تحت عنوان ژنوتیپهای high-risk نام برده می شوند و ژنوتیپ 18 و 16 در بین آنها عامل بیش از 50 % سرطانهای مرتبط با این ویروس هستند و عفونت ویروسی ایجاد شده توسط آنها در نهایت منجر به بروز سرطان رحم می شود که دومین سرطان رایج در زنان است و هر سال حدود ??? هزار زن به این بیماری مبتلا شده و حدود ??? هزار نفر بر اثر این بیماری جان خود را از دست می دهند از بهترین و پرکاربردترین راههای پیشگیری، بهبود یا درمان بیماریهای عفونی استفاده از واکسن ها می باشد به همین دلیل جهت پیشگیری، بهبود یا درمان بیماری های ناشی از پاپیلوماویروس نیز از واکسن ها استفاده می شود . جهت ساخت یکسری واکسن های پیشگیری کننده از 2 پروتئین l1 و l2 که تولید کپسید می کنند استفاده می شود. درواکسن های درمان کنندهمعمولا یکی از پروتئین های کاندید e7 می باشد و مطالعات در زنان نشان می دهد که پاسخ ایمنی علیه این پروتئین غالبا باعث پس رفت عفونت می شود و از ایجاد عفونت پایدار جلوگیری می کند. . در حال حاضر واکسن هایی که برای ویروس hpv وجود دارد، نمی تواند تمام سروتیپ های پر خطر آن را پوشش دهد و از لحاظ قیمت نیز پر هزینه است. با توجه به اهمیت عفونت پاپیلومائی و کنترل عفونت توسط واکسن و نقش واکسن در تحریک سیستم ایمنی اختصاصی(هومورال و سلولی)، نیاز به ساخت یک واکسن جدید مبتنی بر پپتید با قابلیت ایمنی زائی بر علیه سروتایپ های بیشترhpv ارزش قابل توجهی دارد. علیرغم پروسه های آزمایشی، آنالیز های کامپیوتری روشی آسان برای غربالگری و انتخاب اپیتوپ های آنتی ژنیک b-cell هستند. در این تحقیق واکسن یونیورسال چند اپیتوپی طراحی شده با استفاده از مدل های بیوانفورماتیک برای پاپیلومای تیپ های6، 11، 16، 18، 31، 45 برای پروتئین های ساختمانی اصلی ویروسهای hpv که شامل l1/l2 است در مدل موش آزمایشگاه مورد ارزیابی قرار گرفت. ژن مورد نظر توسط شرکت بیوماتیک سنتز شد و در پلاسمید pet28a کلون شد و در سلول های e.coli bl21de3 بیان شد و در این مطالعه در مرحله ی اول ایمنی زائی آن به همراه ادجوانت های فروند کامل و آلوم در موش های balb/c مورد ارزیابی قرار گرفت. بیان پلاسمید نوترکیب در سلول های e.coli bl21de3 با اضافه کردن 1میلی مولار iptg در طول 4 ساعت کشت القا شد و پروتئین توسط ستون کروماتوگرافیni-nta خالص شد و سپس در برابر آنتی بادی anti-his در وسترن بلات مورد تایید واقع شد. واکسن کاندید همراه با ادجوانت های فروند کامل و آلوم همراه با گروه کنترل pbs به گروههای موشی balb/c (n=6 ) سه بار و به فاصله2 هفته بصورت زیر پوستی تزریق شدند که میزان تزریق در هر سری 10 میکروگرم بود.دو هفته پس از واکسیناسیون آخر، تکثیر لنفوسیت ها با روش brdu، il-4 و سایتوکاین ifn-? با روش الایزا و توتال آنتی بادی ها و ایزوتیپ های igg1, igg2a به روش الایزای غیر مستقیم ارزیابی شدند. نتایج بدست آمده نشان دهنده یک باند در حدود 45کیلو دالتون در وسترن بلات توسط واکسن کاندید تولید شده در میزبان باکتریایی و خالص شده به وسیله ی ni-nta می باشد و واکسیناسیون با واکسن کاندید یونیورسال بر پایه ی l1/l2hpvs منجر به افزایش قابل توجه در پاسخ های ایمنی همورال و سلولی در مقایسه با گروه کنترل شد.