جداسازی و همسانه سازی ژن npr1 گیاه آرابیدوپسیس

کشاورزی موفق نیازمند حفاظت گیاهان در مقابل تنش های زنده و غیرزنده است که موجب وارد شدن خسارات چشمگیری به گیاهان می شود. ازجمله این تنش ها، بیماری های گیاهی هستند. بنابراین انتقال ژن های مقاومت به گیاهان حساس از اهمیت بسیار بالایی برخوردار است. فاکتور رونویسی npr1 یک عامل کلیدی در مسیر پیام رسانی هورمون sa می باشد که با اتصال به پروموتور ژن های pr نقش خود را ایفا می کند و سبب القای مقاومت sar و افزایش چشمگیر مقاومت گیاهان نسبت به پاتوژن ها می شود. در این تحقیق ابتدا cdna آرابیدوپسیس سنتز شد و با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ژن npr1 و تکنیک pcr ناحیه کد کننده این ژن به طول bp1782 تکثیر و پس از برش آنزیمی در وکتور pgbkt7 همسانه سازی شد و برای تائید آن، چهار کلون نوترکیب به توالی یابی ارسال گردید. توالی های حاصله توسط نرم افزار multialign با توالی موجود در ncbi مقایسه شدند. هر چهار کلون در مقایسه با توالی منتشرشده در یک نوکلئوتید و یک آمینواسید تفاوت داشتند که توالی های منتشر شده قبلی را تایید می کند. آزمایش دوبل هیبرید مخمر نشان داد که پروتئین حاصل از این وکتور نوترکیب خاصیت فاکتور رونویسی خود را به خوبی انجام می دهد. با برش آنزیمی و لیگاسیون، npr1 از این وکتور به وکتور بیانی در گیاه منتقل شد تا مقدمات انتقال آن به هر گیاه هدف جهت ایجاد مقاومت به پاتوژنها فراهم گردد