بررسی متابولیت های سیس پلاتین در پلاسمای اولترافیلتره موش ratبه روش .l.c

چکیده ازسال 1965 که خاصیت ضدتوموری ترکیبات پلاتینیوم توسط روزنبرگ کشف گردید، تحقیقات زیادی برروی خواص شیمیایی وفیزیکی مکانیسم عمل وعوارض جانبی این دست ازداروهاانجام گرفته است . یکی ازترکیبات این دسته سیس دی کلرودی آمین پلاتینیوم (2سیس پلاتین) میباشد.ک امروزه بعنوان داروی ضدتومور درشیمی درمانی کاربرد پیداکرده است . این ترکیب ازنظرشیمیایی دوگروه ترک کننده خوب دارد که کلرهامیباشند.مکانیس عمل این دارونیزبراساس واکنش های نوکلئوفیلی است به عبارت دیگرمکانیسم عمل این د ازطریق الکیله کردن عوامل موجوددر dna سلول سرطانی توجیه میشود . عوامل نوکلئوفیل مانند نیتروژن، گوگرد و... به مرکزپلاتین حمله کرده وباعث خارج شدن کلرهامیشودوبدین ترتیب خودجانشین آنهامیگردند.ازت شماره هفت گوانین به عنوان محل اصلی برای این عمل شناخته شده است . بدلیل عدم روش آنالیز مناسب درمورداین ترکیب ابهامات زیادی وجود دارد.یکی از ابهامات درموردمتابولیتهای اصلی آن است .سپس پلاتین به میزان 75 تا 90 درصد دست نخورده ازطریق کلیه هادفع میشود.امادرخون بدلیل وجودعوامل میتوان اسیدهای آمینه ای چون گلیسین متیونین وسیتئین رانام برد . روش مختلفی برای جداسازی متابولیت های سیس پلاتین ارائه شده است که هیچکدام تا نتوانسته است بطور کامل جوابگوی حل این مسئله باشد.یکی ازروشهااستفاده از rp-hplc است . دربررسی به عمل آمده ابتدامقدارمعینی از10 اسیدآمینه رادرمحیط آزمایشگاه با مقدار معینی سیس پلاتین مجاورکرده ودرحرارت ،37 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت هفت روزوده روز نگهداری شدند.ازطرف دیگر خودترکیب سیس پلاتین به میزان 15 میلی گرم به ازاء هرکیلوگرم وزن بدن به موش های سفیدبزرگ تزریق گردیدودرزمانهای 15 دقیق یک ،دو،سه ساعت پس از تزریق خونگیری ازطریق قلب انجام گرفت . خونهای بدست آمده پس ازسانتریفوژ به توسط اولترافیلتر صاف شدند تاسرم اولترافیلت بدست آید . جداسازی این نمونه هابه توسط دستگاه hplc انجام گرفت .دوروش بادوسیستم حلال متفاو برای جداسازی بکارگرفته شد . درروش اول فاز متحرک رادوحلال : a بافرفسفات همراه باسدیم لوریل سولفات و b بافرفسفات همراه با دوپراپانول تشکیل میدادندکه بامتدگرادیان واردستون شده و باعث جداسازی نمونه ها میگردید . روش دوم فازمتحرک رادوحلال :c سدیم لوریل سولفات و : dاستونیتریل تشکیل داده ا ومتدگرادیان بکارگرفته شد . نتایج بدست آمده دردوروش نشان میدهد که طول موج 208 نانومتر حساس ترین طول م برای جداسازی این ترکیبات میباشدازطرف دیگرروش دوم بدلیل پیوند یافتن استونیتری بامحصولات حاصل ازهیدرولیزسیس پلاتین وهمچنین موادموجود درستون روش مناسبی نیست ازمقایسه پیک کمپلکس پلاتین - اسیدهای آمینه درخارج ازمحیط بیولوژی وپیک های بدست آمده ازسرمهای اولترافیلتره ثابت شد که ترکیب سیس پلاتین بامیتونین وت کمپلکس های دی آمین متیونین پلاتینیوم 2 و دی متیونین پلاتینیوم 2 درپلاسمای موش امکان پذیرمیباشد.واین کمپلکس ها متابولیت های اصلی سیس پلاتین میباشد.همچنین تغییرات شیمیایی مشتقات مختلف سیس پلاتین بااسیدهای آمینه ازنظرخصوصیت قطبی وجداسازی آنهابه روش hplc موردبررسی قرارگرفت . دربررسی به عمل آمده استفاده ازبافرفسفات ودوپروپانول بعنوان فازمتحرک نتایج خوبی راارائه دادواین روش بعنوان بهترین روش جداسازی ترکیبات سیس پلاتین به تhplc معرفی میشود .