آلبومین سرم فراوانترین پروتئین یافت شده در پلاسما است که دارای غلظتی معادل ml100/ g 5 در خون می باشد. این پروتئین دارای تمایل زیادی برای پیوند کردن محدوده ی وسیعی از ترکیبات شامل فلزات، اسیدهای چرب، اسیدهای آمینه، متابولیت هایی مانند بیلیروبین و بسیاری از ترکیبات دارویی می باشد. بنابراین به نظر می رسد که مهمترین نقش فیزیولوژیکی این پروتئین، آوردن چنین ترکیباتی در جریان خون تا رسیدن به ارگان های هدف و همچنین حفظ ph و فشار اسمزی پلاسما می باشد. بتا-لاکتوگلوبولین (blg) به عنوان فراوانترین پروتئین آب پنیر، به دلیل ویژگیهای غذایی و عملکردی در صنایع غذایی مورد توجه می باشد. blg گاوی محدوده ی وسیعی از لیگاندها از قبیل رتینول، اسیدهای چرب، فسفولیپیدها و ترکیبات آروماتیک را پیوند می کند. بنابراین blg می تواند به عنوان یک حامل مستعد برای مولکول های هیدروفوب در کاربردهای انتقال کنترل شده، مورد استفاده قرار گیرد. کورکومینوئیدها (1،7-دی آریل-1،6-هپتادی ان-3،5-دی اون ها) یک گروه از ترکیبات طبیعی 1،3- دی کتونی هستند که بخشی از ماده ی زردرنگ زردچوبه را تشکیل می دهند و از نظر فیزیولوژیکی فعال می باشند. کورکومینوئیدها و ترکیبات سنتزی مشابه آنها دارای فعالیت ضدتوموری، آنتی اکسیدانی و ضدالتهابی می باشند. در این تحقیق برهم کنش کورکومین (cur)، دی استیل کورکومین (dac)، بیس دمتوکسی کورکومین (bdmc) و دی استیل بیس دمتوکسی کورکومین (dabc) و همچنین کمپلکس های فلزی گالیم، ایندیم و وانادیل کورکومین و دی استیل کورکومین (ga(cur)3، ga(dac)3، in(cur)3، in(dac)3، vo(cur)2 و vo(dac)2) با پروتئین های آلبومین سرم انسانی (hsa)، آلبومین سرم گاوی (bsa) و بتا-لاکتوگلوبولین گاوی (blg) مورد مطالعه قرار گرفته است. با توجه به پایداری کم کورکومین در محلول های خنثی و قلیایی و نتیجه ی مطالعات سینتیکی قبلی در خصوص پایداری آن در بافرهای مختلف، بافر فسفات 50 میلی مولار با ph 4/6 برای انجام کلیه ی آزمایش ها مورد استفاده قرار گرفت. نتایج آزمایش های تیتراسیون فلورسانس نشان داد که برهم کنش هر یک از ده لیگاند مذکور با پروتئین های hsa، bsa و blg با تشکیل کمپلکس غیرفلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه می باشد. مقادیر ثابت استرن- ولمر (ksv)، ثابت سرعت خاموشی دومولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز داده های فلورسانس به دست آمد. مقایسه ی پارامترهای پیوندی چهار کورکومینوئید cur، dac، bdmc و dabc نشان داد که هر سه پروتئین دارای افینیته بیشتری برای دو کورکومینوئید طبیعی cur و bdmc نسبت به دو کورکومینوئید سنتزی dac و dabc می باشند؛ بنابراین با در نظر گرفتن ساختار شیمیایی این ترکیبات مشخص گردید که گروه های هیدروکسی فنولی در cur و bdmc که در dac و dabc استیله شده اند، نقش مهمی در برهم کنش لیگاند-پروتئین دارند. مقایسه ی پارامترهای پیوندی مربوط به برهم کنش شش کمپلکس فلزی کورکومین و دی استیل کورکومین با هر یک از پروتئین ها مشخص نمود که تفاوت قابل ملاحظه ای در تمایل پیوند شدن آنها به جایگاه پیوندی هر یک از سه پروتئین مذکور وجود ندارد. بنابراین حضور گالیم، ایندیم و وانادیل، تفاوت ساختار شیمیایی کورکومین و دی استیل کورکومین در برهم کنش با پروتئین را تحت الشعاع قرار می دهد. با این وجود در برهم کنش با دو پروتئین آلبومین سرم، به طور بسیار جزئی ثابت های پیوندی مربوط به کمپلکس های cur از کمپلکس های dac دارای مقادیر بیشتری است. بررسی انتقال انرژی از hsa و bsa به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که هر یک از این لیگاندها در نزدیکی 214trp در مورد hsa و 213trp در مورد پروتئین bsa پیوند شده اند و بنابراین جایگاه پیوندی آنها به احتمال زیاد در زیردامنه ی iia یا همان جایگاه i می باشد. نتایج بررسی طیف های دورنگ نمایی دورانی (cd) در ناحیه ی فرابنفش دور مشخص نمود که تغییر بسیار چشمگیر و شاخص در ساختار دوم هر یک از پروتئین های مورد مطالعه به واسطه ی برهم کنش با کوروکومین و سه مشتق آن رخ نمی دهد. تغییرات جزئی با روند نامنظم و در برخی موارد با روند غیرمعمول در ساختار دوم، ممکن است ناشی از تغییرات اندک در کنفورماسیون پروتئین محدود به جایگاه پیوندی باشد و برهم کنش پیوندی با لیگاندهای مذکور، مستلزم تغییرات قابل ملاحظه در پیچش و پایداری پروتئین نیست و تغییرات اندک در کنفورماسیون پروتئین تنها در محل جایگاه پیوندی متمرکز شده است. مطالعه ی طیف های cd القایی در ناحیه ی فرابنفش نزدیک و مرئی و ظهور اثرات کاتن در این طیف ها، فعالیت نوری القایی به واسطه ی نحوه ی جهت گیری و قرارگرفتن هر یک از لیگاندها در جایگاه پیوندی نامتقارن پروتئین را نشان می دهد.

در دنیای پیشرفته امروز، ترکیبات آلی فسفردار در میان سایر انواع ترکیبات آلی جایگاه ویژه ای دارد وتوجه بسیاری از محققین را به خود جلب کرده است. این ترکیبات در صنعت، کشاورزی و شیمی دارویی مورد استفاده قرار می گیرند و هم چنین حدواسط های مهمی در سنتز سایر ترکیبات آلی هستند. دسته بسیار مهمی از این ترکیبات ?-آمینوفسفینیک اسیدها هستند که در منابع علمی روش های محدودی برای تهیه آنها گزارش شده است. بنابراین ارائه روش های جدید برای سنتز این دسته از ترکیبات در حال حاضر دارای اهمیت است. در این پروژه نیز روش هایی برای سنتز مشتقات جدیدی از این خانواده گزارش شده است. در بخش اول رساله، سنتز مشتقات جدیدی از ?-آمینوفسفینیک اسید ارائه شده است. از واکنش آمین های نوع دوم با فرمالدئید و سپس هیپوفسفروس اسید، بیس(?-آمینومتیل)فسفینیک اسید و مونو(?-آمینومتیل)فسفینیک اسید تشکیل می شود. خالص سازی محصول از مخلوط واکنش با استفاده از سیستم دو حلال امتزاج ناپذیر و بدون استفاده از ستون کروماتوگرافی انجام می شود که یکی از مهمترین مزایای روش ارائه شده است. ساختار ترکیبات ?-آمینوفسفینیک اسید به وسیله تجزیه عنصری و رزونانس مغناطیسی هسته تعیین شده است. در ادامه با توجه به گزارش هایی که از توانایی تشکیل کمپلکس لیگاندهای پنج دندانه ای و سه دندانه ای، ?-آمینو فسفینیک اسیدها با فلزات و کاربردهای درمانی متعدد و نقش آنها در استخراج برخی فلزات ارائه شده است، ثابت تفکیک اسیدی و امکان کمپلکس کنندگی آنها با یون های فلزی واسطه و لانتانیدها مورد مطالعه قرار گرفته است. همچنین یکی از لیگاندها با استفاده از تیتراسیون رزونانس مغناطیس هسته در ph های مختلف در حضور و عدم حضور یون فلزی کادمیم(ii) مورد بررسی قرار گرفته است. در بخش دیگر با توجه به کمپلکس کنندگی خوب لیگاندهای مورد مطالعه با وانادیم استیل استونات کمپلکس وانادیل تشکیل شد. ساختار کمپلکس مورد نظر با استفاده از طیف سنج جرمی و ft-ir و تجزیه عنصری تعیین شده است. با توجه به اهمیت ترکیبات وانادیل در کنترل و درمان بیماری دیابت، بررسی برون سلولی در شرایط آزمایشگاه بر روی عملکرد دو آنزیم ?-آمیلاز و ?-گلیکوزیداز که کنترل قند خون را بر عهده دارند، انجام شد و بررسی ها نشان می داد که این کمپلکس توانایی زیادی برای کاهش قند خون دارد. در ادامه با توجه به فعالیت های بیولوژیکی بسیار زیاد ترکیبات فسفردار ، برهم کنش آنها با پروتئین آلبومین سرم گاوی با استفاده از روش های تیتراسیون فلورسانس پروتئین توسط لیگاند در 4 دمای 15، 20، 25 و 30 درجه سانتی گراد، طیف-سنجی دورنگ نمایی دورانی در ناحیه فرابنفش دور و فرابنفش نزدیک وطیف سنجی فلورسانس سینکرونوس و تیتراسیون فلورسانس پروتئین با لیگاند در حضور یون های فلزی مانند k+، mg2+، co2+، ni2+ و آمونیم متاوانادات مورد مطالعه و بررسی قرار گرفت. در همین راستا برهم کنش آنها با dna-تیموس گوساله با استفاده از طیف سنجی فلورسانس در دو دمای 27 و 37 درجه سانتی گراد مورد بررسی قرار گرفت. در بخش پایانی ترکیب جدید فسفینیک اسید با زنجیره ی آلکیلی بلند از خانواده ی فسفولیپیدها از واکنش بیس (?-هیدروکسی متیل)فسفینیک اسید با اولئیل کلرید در حضور پیریدین سنتز می شود.

در این تحقیق برهم‏کنش سه ترکیب پلی فنولی طبیعی جنیستین، کامفرول و رزوراترول با لیزوزیم سفیده‏ی تخم مرغ مورد مطالعه قرار گرفته است. لیزوزیم یکی از آنزیم‏های مونومری با کد e.c.3.2.1.17 است و با نام‏های مورامیداز وn- استیل‏مورامید‏ گلیکان‏هیدرولاز نیز شناخته شده است. جنیستین (4،5،7-تری‏هیدروکسی ایزوفلاون) با نام آیوپاک 5،7-دی‏هیدروکسی-3-(4-هیدرو‏کسی‏فنیل)‏کرومن-4-اون یکی از ایزوفلاونوئیدهای طبیعی در گیاهانی مانند دانه‏های سویا و نخود است. کامفرول (3،4،5،7-تترا‏هیدروکسی‏فلاون)، با نام آیوپاک 3،5،7-‏تری‏هیدروکسی-2-(4-هیدروکسی‏فنیل)-h4-4-کرومن-4-اون، است و از چای و بروکلی استخراج می‏شود. ترانس- رزوراترول (3،4‏،‏‏5‏-ترانس-تری‏‏هیدروکسی‏‏استیل‏بن) یک پلی فنول فیتوآلکسین است که در انواع گونه‏های گیاهی از قبیل بادام زمینی و انگور وجود دارد. با توجه به اهمیت خواص بیولوژیکی و دارویی سه ترکیب جنیستین، کامفرول و رزوراترول و همچنین ویژگی‏های بیولوژیکی لیزوزیم، در این تحقیق برهم‏کنش لیگاندهای یاد شده با پروتئین لیزوزیم سفیده‏ی تخم‏ مرغ با استفاده از فلورسانس حالت پایا، فلورسانس سینکرونس، کالریمتری روبشی تفاضلی، طیف‏سنجی دو رنگ‏نمایی دورانی، آشکارسازی فیبریل‏های آمیلوئید، انتقال انرژی از پروتئین به لیگاند و طیف‏سنجی مرئی-فرابنفش انجام شد. نتایج آزمایش‏های تیتراسیون فلورسانس نشان داد که بر‏هم‏کنش هر یک از سه لیگاند مذکور با لیزوزیم با تشکیل کمپلکس غیر فلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه است. مقادیر ثابت استرن-ولمر (ksv)، ثابت خاموشی دومولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز داده‏های فلورسانس به دست آمد. بررسی انتقال انرژی از لیزوزیم به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که این سه لیگاند در نزدیکی تریپتوفان‏ 62 در جایگاه پیوندی به فواصل 8/2 تا 4 نانومتر قرار گرفته‏اند. در بررسی طیف‏های سینکرونس مشاهده شد که لیگاندهای موردنظر در فرایند برهم‏کنش با لیزوزیم به دنباله‏های تریپتوفان نزدیک‏اند و قطبیت محیط اطراف آن‏ها را تغییر می‏دهند. مطالعه‏ی طیف‏های circular dichroism (cd) فرابنفش دور نشان می‏دهد که تغییر بسیار چشمگیر و شاخص در ساختار دوم پروتئین لیزوزیم به واسطه‏ی برهم‏کنش با جنیستین، و رزوراترول رخ نمی‏دهد ولی تغییرات نسبتاً چشمگیری در کامفرول مشاهده می‏شود. در بررسی نتایج آمیلوئیدی مشخص شد که افزایش غلظت لیگاندهای کامفرول و رزوراترول باعث کاهش تجمع آمیلوئیدی لیزوزیم شده است که این کاهش در رزوراترول بسیار بیشتر از کامفرول دیده شده است. همچنین در مطالعه‏ی گرماسنجی روبشی تفاضلی برهم‏کنش سه لیگاند جنیستین، کامفرول و رزوراترول با لیزوزیم مشاهده شد که tm لیزوزیم (دمایی که پروتئین 50 درصد به صورت واسرشته و 50 درصد به صورت باز شده وجود دارد) با افزایش هر سه لیگاند مذکور افزایش می‏یابد که نشان دهنده‏ی افزایش پایداری لیزوزیم در حضور لیگاندها است.

کورکومین، یک ترکیب پلی¬فنولی طبیعی است که از ریزوم¬های گیاه کورکوما لانگا معروف به زردچوبه به ¬دست می¬آید. طیف گسترده¬ای از فعالیت¬های زیستی و دارویی از جمله اثرات ضد-سرطانی، آنتی¬اکسیدانی، ضد¬میکروبی و ضد¬التهابی برای کورکومین گزارش شده است. کمپلکس شدن کورکومین با فلزات به دلیل افزایش پایداریش در سال¬های اخیر مورد توجه بوده است. در این مطالعه به بررسی اثر دو کمپلکس وانادیل¬کورکومین (vo(cur)2) و وانادیل دی استیل کورکومین (vo(dac)2) بر عملکرد و ساختار آنزیم پراکسیداز تربچه کوهی با استفاده از روش¬های طیف-سنجی پرداخته شد. علاوه بر این اثرات ضد¬سرطانی و ضد¬باکتریایی این دو کمپلکس به ترتیب با استفاده از روش¬های mtt و روش آزمون رقت مورد بررسی قرار گرفت. آزمایشات ما در مطالعات آنزیمی نشان داد که این کمپلکس¬ها به طور قابل توجهی فعالیت hrp را بهبود بخشیده و علاوه بر آن مقاومت این آنزیم را در شرایط استرس اکسیداتیو افزایش داده اند. پارامتر¬های آنزیمی از جملهvmax ، km و kcat مربوط به سوبسترا¬های پراکسید¬هیدروژن و فنول اندازه¬گیری شد و نتایج نشان داد که در برهمکنش کمپلکس¬ها با hrp میل ترکیبی آنزیم برای پراکسید¬هیدروژن کاهش می¬یابد در حالیکه برای فنول، افزایش می¬یابد. پارامتر¬های ترمودینامیکی مانند انرژی فعال-سازی واکنش آنزیمی (ea)، انرژی آزاد فعال¬سازی (?g#) و آنتالپی فعال¬سازی (?h#) در حضور کمپلکس¬ها به خصوص وانادیل کورکومین کاهش می¬یابد. مطالعات دورنگ¬ نمایی دورانی (cd) نشان داد که در حضور هر دو کمپلکس فشردگی ساختار آنزیم در اطراف گروه کاتالیتیک هِم کاهش می یابد. نتایج فلورسانس ذاتی و سینکرونس نشان داد که نشر آنزیم با افزوده شدن کمپلکس¬ها کاهش می¬یابد که نشان دهنده افزایش فاصله بین گروه هِم و آمینواسید تریپتوفان است. علاوه بر مطالعات آنزیمی، اثر سمیت سلولی کمپلکس¬ها بر سلول¬های سرطانی سینه، مثانه و پروستات بررسی شد. همچنین اثر ضد¬باکتریایی کمپلکس¬ها در برابر باکتری گرم مثبت استافیلوکوکوس اورئوس و باکتری گرم منفی اشرشیا کولی مورد مطالعه قرار گرفت. وانادیل-کورکومین و وانادیل دی استیل کورکومین در مقایسه با کورکومین، به عنوان یک مهار کننده تکثیر سلولی موثرتر، برای سلول¬های سرطانی مثانه بوده¬ا¬ند. مقایسه فعالیت ضدسرطانی دو کمپلکس¬ تأثیر تقریباً مشابهی را بر روی هر سه رده سلولی نشان می¬دهد. نتایج ضد¬باکتریایی نشان داد وانادیل دی استیل کورکومین تنها در برابر باکتری اشرشیاکولی موثر است در حالیکه وانادیل¬کورکومین فعالیت ضد¬میکروبی برای هر دو باکتری گرم مثبت و گرم منفی نشان داد.

در این تحقیق برهم‏کنش سه ترکیب فلزی کورکومین به نام¬های گالیم¬کورکومین، وانادیل¬کورکومین و ایندیم¬کورکومین با پروتئین مدل لیزوزیم سفیده‏ی تخم مرغ مورد مطالعه قرار گرفته است. لیزوزیم نقش¬های دارویی و فیزیولوژیکی بسیاری در بدن ایفا می¬کند بنابراین به عنوان یک پروتئین مدل می¬تواند استفاده شود. کورکومین هم اصلی¬ترین ماده موجود در زردچوبه است که موجب رنگ زرد این ترکیب می¬شود. در این تحقیق برهم‏کنش لیگاندهای یاد شده با پروتئین لیزوزیم سفیده‏ی تخم‏مرغ با استفاده از فلورسانس حالت پایا، فلورسانس سینکرونس، طیف‏سنجی دورنگ‏نمایی دورانی، آشکارسازی فیبریل‏های آمیلوئید، انتقال انرژی از پروتئین به لیگاند، جذب¬سنجی و طیف‏سنجی مرئی-فرابنفش انجام شد. نتایج آزمایش‏های تیتراسیون فلورسانس نشان داد که بر‏هم‏کنش هر یک از سه لیگاند مذکور با لیزوزیم با تشکیل کمپلکس غیر فلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه است. مقادیر ثابت استرن-ولمر (ksv)، ثابت خاموشی دومولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز داده‏های فلورسانس به دست آمد. بررسی انتقال انرژی از لیزوزیم به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که این سه لیگاند در نزدیکی تریپتوفان‏ 62 در جایگاه پیوندی به فواصل 5/2 تا 5/4 نانومتر قرار گرفته‏اند. در بررسی طیف‏های سینکرونس مشاهده شد که لیگاندهای موردنظر در فرایند برهم‏کنش با لیزوزیم قطبیت محیط اطراف دنباله¬های تیروزین و تریپتوفان را تغییر نمی‏دهند. در بررسی نتایج آمیلوئیدی مشخص شد که افزایش غلظت هر سه لیگاند باعث کاهش تجمع آمیلوئیدی لیزوزیم شده است. بر اساس نتایج محاسبات دمایی کمپلکس نهایی بین این سه لیگاند و پروتئین لیزوزیم با استفاده از برهم¬کنش¬های هیدروژنی پایدار می¬شود منفی¬تر بودن تغییرات آنتالپی اتصال وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم نسبت به آنتالپی اتصال گالیم¬کورکومین-لیزوزیم نشان¬دهنده قوی¬تر بودن پیوند وانادیل¬کورکومین-لیزوزیم و ایندیم¬کورکومین-لیزوزیم است که در هماهنگی کامل با ثابت ظاهری پیوندی است.

کورکومین ادویه طبیعی هندی است که به عنوان بخش فعال در گیاه زردچوبه وجود دارد. این ترکیب دارای خواص مفید گسترده¬ای مثل خواص ضد التهابی، ضد اکسیدانی، ضد باکتریایی، بازدارنده شیمیایی و همین-طور فعالیت شیمی¬درمانی است. ارزیابی آنالوگ¬ها یا ترکیبات جدید کورکومین به خاطر خواص درمانی آن¬ها برای محققین جذاب است. کمپلکس¬های فلزی کورکومین یکی از موضوعات تحت بررسی است و تعدادی از ترکیبات دارای اجزا فعال داروئی با خواص بهبود یافته اخیراً سنتز شده است. گالیم کورکومین و گالیم دی¬ا¬ستیل کورکومین توسط خسرو محمدی در سال 2005 سنتز و ویژگی¬های آن¬ها تعیین شد. در این تحقیق خواص ضد باکتریایی و ضد سرطانی این دو کمپلکس کورکومینی بررسی شد. علاوه بر این اثر کمپلکس¬ها بر (hrp) horseradish peroxidase در این تحقیق ارزیابی شد. تحقیقات آنزیمی نشان داد که هر دو کمپلکس، نه تنها باعث افزایش فعالیت آنزیم می¬شوند بلکه مقاومت آنزیم را نیز در شرایط اکسیداتیو افزایش می¬دهند. همچنین نتایج نشان دادند که تمایل hrp برای سوبسترای پراکسید هیدروژن کاهش می¬یابد، در حالی که تمایل برای فنول، سوبسترای دیگر آنزیم، در اثر میانکنش کمپلکس¬ها با آنزیم افزایش می¬یابد. انرژی فعال¬سازی واکنش آنزیمی ea#، g#? و h#? به خصوص در حضور گالیم کورکومین کاهش می¬یابد. افزایش فعالیت آنزیم می¬تواند به علت تغییرات مشاهده شده در پارامترهای ترمودینامیکی باشد. علاوه بر این vmax و km را نیز می¬توان با تغییرات ساختمانی hrp که به علت میانکنش آنزیم با کمپلکس¬ها رخ داده تفسیر کرد. مطالعات دورنگ نمایی دورانی نشان دادند که این ترکیبات فشردگی ساختمان اطراف گروه کاتالیتیکی هِم آنزیم را کاهش می¬دهند. نتایج اسپکتروسکوپی فلورسانس نشان دادند که فاصله بین گروه هِم و اسیدهای آمینه احتمالاً در حضور کمپلکس¬ها افزایش می¬یابد. سنجش mtt نشان داد که گالیم کورکومین و گالیم دی¬ا¬ستیل کورکومین بر رده¬های bladder، lncap و mcf-7 اثر سمیت سلولی دارد. اثر کمپلکس¬ها بر باکتری استافیلوکوکوس آرئوس و اشرشیا کولی آزمایش شد. هر دو کمپلکس اثر چندانی بر این باکتری¬ها نشان ندادند.

در این تحقیق برهم کنش سه کمپلکس گالیم دی استیل کورکومین، ایندیم دی استیل کورکومین و وانادیل دی استیل-کورکومین با لیزوزیم سفیده ی تخم مرغ مورد مطالعه قرار گرفته است. لیزوزیم یک پروتئین کروی شامل شش تریپتوفان در توالی اسیدآمینه های 28، 62، 63، 108، 111 و 123 است و با نام مورامیداز نیز شناخته می شود. با توجه به اهمیت خواص بیولوژیکی و دارویی سه ترکیب گالیم دی استیل کورکومین، ایندیم دی استیل کورکومین و وانادیل دی استیل کورکومین و همچنین ویژگی های بیولوژیکی لیزوزیم، در این تحقیق برهم کنش لیگاندهای یاد شده با پروتئین لیزوزیم سفیده ی تخم مرغ با استفاده از طیف سنجی مرئی-فرابنفش، فلورسانس حالت پایا، فلورسانس سینکرونس، طیف سنجی دورنگ نمایی دورانی، آشکارسازی فیبریل های آمیلوئید، انتقال انرژی از پروتئین به لیگاند و میکروسکوپ نیروی اتمی (afm) انجام شد. نتایج آزمایش های تیتراسیون فلورسانس نشان داد که برهم کنش هر یک از سه لیگاند مذکور با لیزوزیم با تشکیل کمپلکس غیر فلورسنت بین لیگاند و پروتئین با استوکیومتری 1:1 همراه است. مقادیر ثابت استرن-ولمر (ksv)، ثابت خاموشی دو مولکولی (kq) و ثابت پیوندی (ka) از آنالیز داده های فلورسانس بدست آمد. بررسی انتقال انرژی از لیزوزیم به هر یک از لیگاندهای مذکور نشان داد که این سه لیگاند در نزدیکی تریپتوفان 62 در جایگاه پیوندی به فواصل 2 تا 5 نانومتر قرار گرفته اند. در بررسی طیف های سینکرونس مشاهده شد که لیگاندهای مورد نظر در فرآیند برهم-کنش با لیزوزیم به دنباله های تریپتوفان نزدیک اند و قطبیت محیط اطراف آنها را تغییر نمی دهند. در بررسی نتایج آمیلوئیدی مشخص شد که افزایش غلظت لیگاندهای گالیم دی استیل کورکومین، ایندیم دی استیل کورکومین و وانادیل دی استیل کورکومین باعث کاهش تجمع آمیلوئیدی شده است. کلمات کلیدی: لیزوزیم؛ گالیم دی استیل کورکومین؛ ایندیم دی استیل کورکومین؛ وانادیل دی استیل کورکومین، طیف سنجی فلورسانس؛ برهمکنش پروتئین-لیگاند؛ تجمع آمیلوئیدی.