نـانو قطرات مایسل معکوس بصورت استخراج مایع- مایع برای جداسازی و خالص سازی آنزیم گلوکوآمیلاز استفاده شد. گلوکوآمیلاز پرمصرف ترین آنزیم صنعتی هیدرولیز کننده ی پلی ساکاریدها در صنایع غذایی بوده و لذا خالص سازی مناسب آن اهمیت زیادی دارد. در این پژوهش، آنزیم گلوکوآمیلاز تولید شده به روش تخمیر حالت جامد توسط کشت قارچ آسپرجیلوس نایجر بر روی سبوس گندم، توسط نانوقطرات حاصل از فعال سطحی کاتیونی سی تب (ctab) جداسازی و خالص شد. یک چرخه ی کامل استخراج مایع- مایع با استفاده از نانوقطرات از دو مرحله ی اساسیِ انحلال (انتقال پروتئین ها به درون نانوقطرات) و بازیابی (آزادسازی پروتئین به درون فاز آبی عریان ساز) تشکیل شده است. تأثیر عواملی از قبیل نوع بار فعال سطحی، ph و قدرت یونی فاز آبی، نسبت حجمی فاز ها، غلظت فعال سطحی و کمک حلال بر هر دو فرآیند انحلال و بازیابی آنزیم بررسی شد. علاوه بر روش تک پارامتری از روش آماری رویه پاسخ با استفاده از طرح مرکب مرکزی چرخشی(ccrd) برای تحلیل و بهینه نمودن پارامتر های فوق به کار گرفته شد. با استفاده از تجزیه و تحلیل داده ها، بیشینه بازدهی فرآیند انحلال به صورت تابعی از متغیر های ph، غلظت nacl، غلظت فعال سطحی و کمک حلال به ترتیب در 8، mm 50، mm100 و 10 درصد حجمی به دست آمده است. همچنین مقادیر ph و غلظت nacl برای داشتن حداکثر بازیابی به ترتیب 2/4 و mm 417 بوده است. در ادامه با بهینه سازی نسبت حجمی فاز ها برای هر دو فرآیند، ضریب خالص سازی و بازدهی بازیابی آنزیم که برای شرایط بهینه شده ی حاصل از طراحی آزمایشگاهی به ترتیب 15/2 و % 73 بوده، به 7/2 و % 76 ارتقاء یافت. این پژوهش نشان می دهد که استخراج مایع- مایع توسط نانوقطرات حاصل از فعال سطحی سی تب، فرآیندی موثر و کارآمد در جداسازی آنزیم گلوکوآمیلاز است.