نام پژوهشگر: سیده طاهره عبداللهی

خالص سازی پروتئین همولیتیک/درمونکروتیک از زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه 1390
  سیده طاهره عبداللهی   دلاور شهباززاده

زمینه و هدف:عقرب گزیدگی یکی از مشکلات سیستم بهداشت عمومی در کشورهای زیادی است . عقرب دومین علت مرگ ومیر بعد از مار بعلت گزش است . گونه های از عقرب با نیشهای کشنده در شمال و جنوب آفریقا , شرق میانه, آمریکا , ترینیداد و توباگو زندگی میکنند . همیسکورپیوس لپتوروس ( از خانواده اسکورپیونیده و اخیراً در گروه خانواده لیوکلیده) از مهمترین عقرب از نظر بیشترین موارد بالینی در ایران است که علت 95% مرگ و میر ناشی از همه موارد عقرب گزیدگی بیمارستانی است . زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس اصولا عامل سیتوتوکسیک است , و فعالیتهای همولیتیک , درمونکروتیک , نفروتوکسیک , و تا اندازه ایی هپاتو توکسیک دارد. روش بررسی: زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس از استان خوزستان بدست آمد. روش استاندارد rp-hplc برای تفکیک پروتئینهای و پپتیدها بر روی زهر عقرب همیسکورپیوس انجام شد فراکشنها جمع آوری و خشک گردید و در آب مقطر استریل حل گردیدند . تست همولیتیک بر روی فراکشن ها بدست آمده از rp-hplc انجام شد و فراکشنهای همولیتیک تعیین گردید . تست sds-page بر روی فراکشنهای همولیتیک انجام گرفت و وزن مولکولی آنها در محدوده kda 32 مشخص گردید . سپس بر روی فراکشنهای همولیتیک تست درمونکروتیک (بر روی خرگوش) انجام گردید . یافته ها: 103 فراکشن از زهر عقرب همیسکورپیوس لپتوروس از طریق ستونc18 ، rp-hplc جمع آوری شد و 9 پیک عمده در تست مشاهده گردید . از میان 103 فراکشن که تست sds-page بر روی آنها قرار گرفت 6 فراکشن در محدوده kda 32 قرار داشتند تست همولیتیک بر روی آنها انجام شد و 4 فراکشن فعالیت همولیتیک گوناگون نشان دادند که در میان آنها فراکشن در محدوده زمانی 55/157 بیشترین فعالیت همولیتیک را از خود نشان داد . در تست درمونکروتیک بر روی پوست خرگوش این فراکشنها با غلظت 5 و 20 میکروگرم فعالیت از خود نشان دادند که بیشترین میزان فعالیت متعلق به فراکشن با محدوده زمانی55/157 بود . نتیجه گیری: زهرعقرب همیسکورپیوس لپتوروس دارای بیشترین فعالیت سیتوتوکسیک می باشد . در rp-hplc تعداد 4 فراکشن با فعالیت همولیتیک و درمونکروتیک مشخص گردید . در آزمایش sds-page همه این 4 فراکشن در محدوده 32-35 کیلو دالتون بودند . به نظر میرسد که تفاوت شدت در این 4 فراکشن rp-hplc در خصوصیات همولیتیک و درمونکروتیک به سبب ایزومرهای متفاوت از یک پروتئین اصلی باشد .