مقدمه: القا پالس الکتریکی سبب به هم ریختگی در ساختار منظم غشایی شده و این بی نظمی خود همراه با ایجاد گذرگاههای آبی در عرض غشا و نتیجتا افزایش نفوذ پذیری و ورود ماکروملکولها به داخل سیستوپلاسم سلول است. این تکنیک الکتریکی، الکتروپوریشن نامیده می شود. اگر استفاده از پالسهای الکتریکی را با شیمی درمانی همراه کنیم به روشی موثر در درمان تومورهای سرطانی به نام الکتروکموتراپی دست خواهیم یافت. از مزایای الکتروکموتراپی می توان به ساده و کوتاه بودن دوره درمان، کاهش دز داروی مصرفی نسبت به شیمی درمانی و به حداقل رساندن آثار جانبی شیمی درمانی، اشاره کرد. اما این روش هم مانند دیگر روش های درمانی، محدودیت هایی را به همراه دارد که با توجه به نوین بودن آن نیاز به مطالعات بیشتری را می طلبد.از جمله مشکلات وارد بر این روش ایجاد درد در اثر تحریک الکتریکی و همچنین سوختگی در ناحیه درمان، می باشد. درد ناشی از این روش در اثر میدان های قوی و فرکانس پایین است بنابراین با استفاده از شدت های پایین و فرکانس های بالا می توان بر این دو مشکل فائق آمد. در این تحقیق ما با ترکیب این دو پارامتر سعی در رفع معایب موجود در پروتکل متداول داریم. بدین منظور ما در این تحقیق در ابتدا موثرترین تعداد پالس را در شدت میدان 100 ولت برسانتی متر و فرکانس 5 کیلوهرتز ، مانند پروتکل متداول تخمین زده و سپس با استفاده از نتایج این بخش اثر سه شدت میدان پایین 70، 100 و 150 ولت بر سانتی متر و فرکانس 5 کیلوهرتز مورد مطالعه قرار دادیم. مواد و روش ها: تحریک الکتریکی برروی موش ماده balb/c حامل تومور آدنوکارسینومای پستان ، همراه با تزریق داخل توموری داروی بلومایسین صورت گرفته است. در این تحقیق از دو پرتکل شدت های بالا و شدت های پایین استفاده شده است. گروه های تحقیق این آزمایش عبارتند از 4 گروه شدت بالای : 1- الکتروکموتراپی با شدت میدان 1000 ولت برسانتی متر و فرکانس 5 کیلوهرتز 2- الکتروکموتراپی با شدت میدان 1000 ولت برسانتی متر و فرکانس 1 هرتز 3- الکتروپوریشن با شدت میدان 1000 ولت برسانتی متر و فرکانس 5 کیلوهرتز4- الکتروپوریشن با شدت میدان 1000 ولت برسانتی متر و فرکانس 1 هرتز. 4 گروه شدت میدان پایین 100 ولت بر سانتی متر و فرکانس 5 کیلوهرتز : 1- 500 پالس ( معادل با 1 پالس با پهنای باند50 میلی ثانیه) 2- 2000 پالس ( معادل با 4 پالس با پهنای باند50 میلی ثانیه)3- 4000 پالس (معادل با 8 پالس با پهنای باند50 میلی ثانیه) 4- 5000 پالس ( معادل با 10 پالس با پهنای باند 50 میلی ثانیه). در پایان این بخش موثرترین تعداد پالس به ازای شدت میدان های پایین و فرکانس بالا تخمین زده می شود. بررسی سه گروه 3 شدت میدان پایین 70و 100. 150ولت بر سانتی متر به ازای تعداد پالس انتخاب در بخش قبل و فرکانس 5 کیلوهرتز و آخرین گروه این تحقیق نیز عبارت است از گروه درمانی با پالس تنها به ازای بهترین گزینه گروهها 70 ،100و 150 ولت بر سانتی متر. نتایج تحقیق: نتایج این تحقیق نشان دادند که اثر مهار رشد تومور در فرکانس های بالا مشابه با فرکانس 1 هرتز است. تعداد 4000 پالس که دارای مدت زمان تحریکی معادل با 8 پالس 50 میلی ثانیه ای است موثرترین تعداد پالس در شدت پایین است. در میان شدت میدان های پایین نیز 4000پالس با دامنه 70 ولت بر سانتی متر و فرکانس 5کیلوهرتز بیشترین اثر را بر کاهش حجم تومور دارا می باشد. این پروتکل در صورت اعمال پالس تنها ( بدون دارو) نیز توانایی درمان را دارد.

الکتروپوریشن روشی نوین همراه با افزایش نفوذپذیری سلول ها است که با انتخاب مناسب پارامترهای الکتریکی می توان سلول-ها را نسبت به ماکرومولکول ها، یون ها و ... نفوذپذیر کرد. اگر الکتروپوریشن را با تزریق داروهای شیمی درمانی همراه کنیم، به روش نوین الکتروکموتراپی در درمان تومورها دست خواهیم یافت. الکتروکموتراپی با پروتکل کلینیکی- تجاری، 8 پالس با شدت میدان 1300 ولت برسانتی متر، فرکانس 1 هرتز و عرض پالس100 میکروثانیه، امروزه به عنوان روشی نوین در درمان تومورهای سطحی و جامد وارد فاز کلینیکی خود شده است. این روش مانند هر روش درمانی نوین دارای کاستی هایی است. الکتروکموتراپی درکنار نتایج خوبی که به همراه داشته است باعث ایجاد درد در بیماران تحت درمان می شود. در ضمن ایجاد تاول و سوختگی به عنوان دومین مشکل این روش به شمار می رود. برمبنای تحقیقات صورت گرفته و به منظور رفع برخی از مشکلات این روش تجاری، اخیرا به میدان های الکتریکی با فرکانس های بالا و شدت های پایین توجه شده است. مواد و روش ها: با توجه به اینکه در تحقیقات گذشته مطالعه کاملی برروی شدت میدان های پایین (50 الی 150 ولت برسانتی متر) و فرکانس بالا صورت نگرفته است و میزان اثرگذاری بر بقا و افزایش نفوذپذیری این روش شناخته نشده، در این رساله اثر شدت میدان های بین 50 الی 150 ولت برسانتی متر را در سه فرکانس 4، 5 و 6 کیلوهرتز در شرایط in vitro را مورد بررسی قراردادیم، تا بتوانیم پروتکل موثر را در شرایط in vivo بر مبنای شناخت اثر الکتروپوریشن بر بقا و نفوذپذیری در شدت میدان های پایین و فرکانس بالا در محیط in vitro معرفی کنیم. بدین منظور و جهت برآورده کردن دو اصل الکتروکموتراپی (تعامل بین بقا و افزایش نفوذپذیری) در بخش سلولی، بقا را به روش mtt و نفوذپذیری را با استفاده از داروی شیمی درمانی بلومایسین در سه رده سلول های تومورالk562 (سلول های حساس به درمان) mcf-7 (نیمه مقاوم) وpancreatic (سلول های مقاوم به درمان) و همچنین سلول های اندوتلیال بندناف، بررسی شدند. با انتخاب 3 پرتکل از 33 روش فوق به عنوان پروتکل نامزد در بخش سلولی آزمایشات را در بخش دوم تحقیق بر روی کاهش حجم، آپوپتوز در تومور آدنوکارسینومای پستان موش balb/c انجام دادیم. نتایج: برمبنای نتایج به دست آمده در بخش سلولی چهار پرتکل زیر به عنوان پرتکل بهینه معرفی شدند. 1-شدت میدان 60 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلوهرتز، 2- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 4 کیلو هرتز، 3- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلو هرتز و 4- شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 6 کیلو هرتز. نتایج نشان دادند الکتروکموتراپی با شدت میدان 70 ولت برسانتی متر توانایی کاهش حجم تومور، افزایش آپوپتوز و کاهش درجه تومور را دارا می باشند و در این میان گروه الکتروکموتراپی با شدت میدان 70 ولت برسانتی متر با فرکانس 5 کیلو هرتز مناسب ترین گزینه درمان در درمان تومور پستان موش balb/c است.