نام پژوهشگر: محمد افشارنسب

مطالعه تغییرات مورفولوژیک و بافت شناسی میگوهای پرورشی پاسفید (litopenaeus vannamei) واقع شده در معرض شکوفایی جلبک mesodinium rubrum در شرایط طبیعی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه هرمزگان 1389
  علی تیغ ساززاده   محمد افشارنسب

اهداف: جهت بررسی تغییرات ظاهری و آسیب شناختی و نیز شدت و توسعه آنها در میگوهایی که در معرض شکوفایی جلبکی مضر در شرایط طبیعی بودند، نمونه برداری از استخرهای آلوده به شکوفایی جلبکی و سالم انجام پذیرفت. در عین حال جهت مقایسه شرایط محیطی دو استخر سالم و آلوده نمونه برداری از آب نیز انجام پذیرفت. همچنین میزان و نوع تلفات ناشی از این پدیده در استخرهای تحت تاثیر با استخرهای سالم مقایسه شد. مواد و روش ها: در اواخر پروژه تراکم پذیری میگوی پا سفید غربیlitopenaeuas vannamei که در سال 1388 در استخرهای پرورش میگوی مرکز شهید کیانی در منطقه چوئیبده آبادان انجام پذیرفت، شکوفایی جلبکی مضر منجر به بروز نشانه هایی از بیماری و در نهایت تلفات در یکی از استخرهای این مرکز گردید. نمونه های غیر طبیعی و مشکوک از استخر مورد نظر جمع آوری شدند. در هنگام جمع آوری نمونه ها برخی از علائم ظاهری (ماکروسکوپیک) میگوها در هر مورد ثبت و در فرم جمع آوری نمونه وارد شد. عملیات هیستوپاتولوژی بر روی نمونه های جمع آوری شده بروش دکتر افشار نسب (افشار نسب ، 1386) و دکتر لایتنر (lightner, 1996) که روش استانداردی برای میگو می باشد انجام شد. از سوی دیگر شدت آلودگی بر اساس روش دکتر لایتنر (lightner, 199) محاسبه شد. برخی از فاکتورهای فیزیکی شیمیایی آب استخر مورد مطالعه نظیر دما، اکسیژن، شوری و ph قبل و در هنگام شکوفایی جلبکی ثبت شدند. همچنین مراحل نمونه برداری، تثبیت، تغلیظ و شمارش جهت تعیین گونه و تراکم پلانکتونی مسئول شکوفایی جلبکی انجام پذیرفت. نتایج و بحث: نتایج حاصل از تعیین گونه ای و تراکم فیتوپلانکتونی استخر تحت تاثیر شکوفایی جلبکی مشخص کرد که گونه mesodinium rubrum با تراکم سلولی بسیار بالای (4000000 سلول در لیتر ) گونه غالب و مسئول شکوفایی جلبکی مضر بوده است. در میگوهای تحت تاثیر شکوفایی جلبکی نشانه هایی از قبیل تغییر رنگ آبشش به رنگ قهوه ای تیره و حالت پوسیده ، وجود لکه های سفید بر روی کاراپاس ، قرمز شدگی و پوسیدگی اندامهای حرکتی و دم دیده شد. همچنین نتایج حاصل از عملیات آسیب شناسی نشانه هایی از قبیل تجمع سلول های لنفاوی در آبشش ها، هایپرتروفی و واکوئله شدن سلول های هپاتوپانکراس، وجود گنجیدگیهای مشخص در اندام لنفاوی، حضور تعدادی جلبک m. rubrum بهمراه تعداد زیادی جلبک رشته ای در لومن روده را نشان دادند. نتایج حاصل از تعیین فاکتورهای کیفی آب نشاندهنده افزایش معنی دار شوری – در بین دیگر فاکتورها- در روزهای وقوع شکوفایی جلبکی در استخر تحت تاثیر در مقایسه با استخر شاهد بود (p<0/05). با توجه به اثبات این امر که مزارع پرورش میگو به طور کلی به شکوفایی ها حساس تر اند، شکوفایی هایی همانند این شکوفایی (غیر سمی) می توانند به عنوان علت اولیه، میگوها را برای ابتلا به انواع بیماریها مستعد کنند. در مزارع پرورش میگو عوامل متعددی مسئول شکوفایی جلبکی در نظر گرفته می شوند که شوری مهمترین عامل زیست محیطی در این امر می باشد.

بررسی محافظت میگوی وانامی (litopenaeus vannamei) در برابر ویروس بیماری لکه سفید با استفاده از تجویز خوراکی پروتئین نوترکیب vp28 کپسوله شده زیستی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهید چمران اهواز - دانشکده دامپزشکی 1393
  حسین هوشمند   مسعودرضا صیفی آبادشاپوری

مطالعه حاضر با هدف بررسی امکان محافظت میگوها در برابر ویروس عامل بیماری لکه سفید با استفاده از باکتری e.coli حاوی پروتئین نوترکیب vp28، کپسوله شده زیستی در آرتمیا، طراحی گردید. بدین منظور ژنوم ویروس از میگوهای بیمار در مزارع پرورش میگوی چوئبده آبادان استخراج و با پرایمرهای طراحی شده، ژن vp28 تکثیر، خالص و در باکتری tg1 کلون شد. بیان پروتئین بررسی و باکتری غیرفعال شده حاوی پروتئین نوترکیب در ناپلی آرتمیا کپسوله گردید. سپس پست لاروهای مرحله 5 میگوی سفید غربی به مدت 5 روز با ناپلی های نوترکیب تغذیه شدند و دو بار در روزهای 7 و 25 پس از شروع تغذیه با ناپلی آرتمیا با ویروس لکه سفید چالش شدند. نتایج این تحقیق نشان داد ایمن سازی با vp28 منجر به تلفات کمتری در مقایسه با گروه هایی شد که با پلاسمید غیر نوترکیب واکسینه شده بودند و این نشان دهنده آن است که محافظت ایجاد شده می تواند به علت پروتئین نوترکیب باشد.