کنه های بالاخانواده ‏ixodoidea‏ و به خصوص اعضای دو خانواده مهم ‏ixodidae‏ و ‏argasidae‏ (کنه های ‏سخت و نرم)، ناقلین کارآمد عوامل بیماری زای مهم حیوانی و انسانی می باشند. در این میان کنه های سخت جنس ‏hyalomma‏ علاوه بر اهمیت فوق، از نظر تاکسونومی و تشخیص همواره مورد بحث بوده اند. یکی از این گونه ها ‏hyalomma anatolicum‏ است که درفون هیالوماهای کشور ما نیز وجود دارد و دارای فراوان ترین پراکنش می-‏باشد. این گونه به لحاظ انتقال اجرام عفونی دامی مانند تیلریوز و انسانی به خصوص ویروس تب خونریزی دهنده ‏کنگو کریمه، همچنین کم خونی، ایجاد حساسیت و تحریک دام و در نهایت کاهش تولید شیر و گوشت دارای ‏اهمیت فوق العاده ای از نظر دامپزشکی، پزشکی و اقتصادی می باشد. ‏ با وجود اهمیت زیاد این گونه،اما هنوز مطالعات دقیقی در مورد بیولوژی، اکولوژی، سیستماتیک مولکولی و حتی ‏مورفولوژیک این گونه انجام نشده است. مطالعات ‏delpy‏ در دهه های 20 و 30 ه.ش. مربوط گونه های معدودی ‏می باشد که هنوز هم جای مطالعه بیشتر دارد، به علاوه وی عمدتاً بر روی نتاج های آزمایشگاهی و نه کنه های ‏طبیعت مطالعه کرده است. ما کلید تشخیصی جامع و کاملی که تمام گونه های ایران را پوشش دهد، نداریم و ‏تشخیص بر مبنای کلید کشورهای همسایه است. کلید تشخیصی دلپی نیاز به بررسی مجدد دارد و کلیدهای ‏پراکنده دیگر، عملاً کاربردی نیستند، به علاوه موجودیت برخی گونه ها مانند هیالوما مارژیناتوم کمپلکس هنوز به ‏درستی مشخص نیست گذشته از آنکه هنوز بیولوژی و اکولوژی آن مشخص نشده است. اولین قدم در راه تهیه یک ‏کلید تشخیصی خوب، شناسایی ویژگی های مورفولوژیک یک گونه در سراسر محدوده ای است که می خواهیم برای ‏آن کلید داشته باشیم (که دلپی نیز بر روی آن تاکید داشت) و تشخیص صحیح زمانی میسر است که ما نمونه-‏های بسیاری از یک گونه را مطالعه و سپس اقدام به نوشتن کلید تشخیصی کنیم. این مطالعه ادعا دارد که اولین ‏قدم را در حل این مساله و با یکی از از مهمترین هیالوماهای ایران برداشته است.‏ در این تحقیق، که قسمتی از یک مطالعه وسیع تر است و تقریباً تمام کشور ایران را پوشش می دهد، نمونه های ‏هیالوما آناتولیکوم از پنج ناحیه جغرافیایی واقع در دو استان خوزستان و لرستان، جمع آوری شدند و صفات و ‏خصوصیات مورفولوژیک با اهمیت برای تشخیص این گونه و خصوصیات افتراقی با سایر گونه های نزدیک به آن، ‏مورد بررسی مورفومتریک قرار گرفتند. صفات مورد مطالعه شامل هفت صفت کمی، سه صفت کیفی و چهار صفت ‏نسبتی بودند که توسط استریومیکروسکوپ اندازه گیری شدند. داده های به دست آمده در بسته نرم افزاری ‏spss‏ ‏‏(‏ver-16‎‏) (تست آنوا و تی تست) تحلیل شدند و جداول مربوطه شد. در ادامه با استفاده از ‏drawing tube‏ از ‏اشکال متنوع این گونه در مناطق مورد مطالعه تصویر قلمی تهیه شد.‏ نتایج نشان می دهد که تمام صفات کمی مورد مطالعه در پنج ناحیه جغرافیایی با هم اختلاف معنی دار دارند. در ‏میان نسبت های کمی نیز به جز نسب طول شیار جانبی/طول اسکوتوم تمام صفات دیگر معنی دار شدند. آزمون ‏تی تست معنی داری برخی صفات کمی را در دو جامعه 1 (وجود صفت) و 2 (عدم وجود صفت) نشان داد.‏ تفسیر نتایج این مطالعه نشان می دهد که کنه سخت هیالوما آناتولیکوم در پنج ناحیه جغرافیایی دارای تنوع در ‏صفات مورفولوژیک است و تنها صفتی که ثابت بود، نسبت طول شیار جانبی/طول اسکوتوم می باشد. دامنه و میزان ‏تنوع کمی صفات مورفولوژیک هیالوما آناتولیکوم متضمن این واقعیت است که برای تشخیص صحیح و تهیه کلید ‏شناسایی این گونه، باید در نظر گرفته شوند.‏

کنه ها از جمله انگلهای خارجی اغلب حیوانات می باشند، که علاوه بر اینکه مستقیما منجر به بیماری و آسیب در دام ها می گردند، خود به عنوان مهمترین ناقل برخی از پاتوژن ها، میکروب ها و ویروس ها از حیوانی به حیوان دیگر عمل می کنند. کنترل کنه ها و ایمن کردن دام ها علیه کنه ها امری مهم و ضروری است. یکی از روش های جدید کنترل کنه ها استفاده از نوعی واکسن نوترکیب است که با استفاده از آنتی ژن خاصی که در غشاء پایه سلولهای روده میانی کنه ها وجود دارد، طراحی و ساخته شده است. این واکسن ها به طور صددرصد بر روی گونه های کنه موجود در ایران (هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم ) موثر نمی باشند. بعد از خونخواری، کنه نیاز به جذب و هضم خون دارد، خون از طریق اندوسیتوز وارد سلولهای روده میانی شده و درون لیزوزوم ها و با کمک آنزیم های گوارشی هضم می شود. از طریق بلوکه کردن یکی از آنزیم های گوارشی می توان این پروسه را مختل کرد و به این طریق به کنه آسیب رسانده و آن را از دام جدا کرد. یکی از آنزیم های پروتئولیتیکی مهمی که در سیستم جذب و هضم خون اکثر حیوانات نقش دارد، کربوکسی پپتیداز b است، که با توجه به اثبات حضور آن در دستگاه گوارش کنه، می توان از آن به عنوان یک گزینه برای تهیه واکسن استفاده کرد. ما بعد از استخراج روده میانی کنه هیالوما آناتولیکوم آناتولیکوم، آنرا به بافر هنکس انتقال داده سپس به مدت 90 ثانیه با کلروهگزیدین 2/0 درصد شستشو دادیم. سپس به ترتیب با بافر هنکس، الکل 70 درصد و در نهایت روده ها مجددا در بافر هنکس چندین بار شستشو داده شدند. برای جداسازی بافتها و سلولها از یکدیگر از آنزیم کلاژنازmg/ml 2/0 استفاده کردیم، بعد از شستشو با بافر هنکس و fbs 15% سلولها را تحت شرایط rpm2400 و دمای 28 به مدت 5 دقیقه سانتریفوژ کردیم، با کمک محیط کشت مخصوص حشرات (t c-100) سلولها را کشت داده و بعد از 48 ساعت سلولهای رشد کرده و چسبیده شده به ته چاهکهای ول را جدا کرده ، محتویات سیتوپلاسمی را از غشاء سلولی بوسیله سانتریفوژ جدا کردیم. با کمک تریتون x-100 (2 درصد) پروتئین های غشاء سلولی را آزاد کردیم و با کمک استن، پروتئین های غشایی را رسوب دادیم. محلول رویی که حاوی پروتئین های سیتوپلاسمی است و محلول حاوی پروتئین های غشایی را به روش ژل فیلتراسیون کروماتوگرافی کردیم. فراکشن حاوی کربوکسی پپتیداز b را الکتروفورز کردیم و در نهایت فعالیت ویژه آنزیم 3/143 و وزن مولکولی آنرا 39810 بدست آوردیم. همچنین با توجه به بررسی های انجام شده جایگاه کربوکسی پپتیداز b را مانند دیگر موجودات در غشاء سیتوپلاسمی احتمال دادیم.

کنه های دامی یا کنه های سخت گروهی از بندپایان هستند که انتشار جغرافیایی وسیعی در جهان دارند . کنه ها سالانه خسارات زیادی به صنعت دامپروری کشورها وارد می نمایند . کنه ها و امراض ناشی از آنها یکی از معضلات جدی پرورش دام در بسیاری از کشورها از جمله ایران محسوب می شود. یکی از روش های جدید کنترل کنه ، واکسیناسیون دام ها با نوع جدیدی از واکسن نوترکیب می باشد که از مولکول های آنتی ژنی خاص غشای سلول روده میانی کنه ها طراحی و ساخته شده اند . نام تجاری واکسن استرالیا ) دو ) tick gard نام تجاری واکسن کوبا ) و ) gavac واکسن های یک bm ساخته شده اند . 86 bm واکسن مهم از این نوع می باشد که با استفاده از آنتی ژن نوترکیب 86 است که موفقیت چشم گیری در کنترل کنه boophilus microplus گلیکوپروتئین مربوط به روده میانی کنه bm مولکول 86 h.anatolicum..anatolicum داشته است. با توجه به تاثیر بالای این واکسن روی کاندیدی مناسب جهت ساخت آنتی بادی منوکلونال به شمار می رفت. 1در مطالعات قبلی با استفاده از ساخته شده است و با آنتی بادی تولید شده آنتی ژن bm آنتی بادی منوکلونال علیه 86 balb/c موشهای شناسایی شده است. با توجه به تاثیر بالای این واکسن روی h.anatolicum..anatolicum ایمونوژن در کاندیدی مناسب جهت ساخت آنتی بادی منوکلونال به شمار bm مولکول 86 h.anatolicum..anatolicum . می رفت. 2 علیه روده میانی کنه mab bm در این تحقیق سعی شده است تا با استفاده از آنتی بادی منوکلونال 86 hyalomma anatolicum و rhipicephalus turanicus ، boophilus annulatus های مختلف شامل ساختارهای مشابه بین این کنه ها جستجو شود . بدین منظور پس از تشریح کنه های ماده anatolicum بالغ خونخورده و جداسازی روده میانی ، سوپ سلولی حاصل جهت آزمون ایمونوفلورسنت غیر مستقیم و و مولکول های روده bm وسترن بلات بکار گرفته شد و در نتیجه ساختار های مشترکی ما بین مولکول 86 86 و 95 کیلودالتون بدست ، 55 ، 34 ، 26 ، میانی کنه ها به دست آمد و مولکول هایی با وزن مولکولی 72 آمد .

آنتی ژن پنهان در مقابل آنتی ژن آشکار به عنوان اصلی بنیادین در ساخت واکسن بر ضد گونه¬های مختلف کنه استفاده شده است. در میان آنتی ژن های پنهان، bm86 به عنوان گلیکوپروتئین اختصاصی امروزه درساخت واکسنهای ضدکنه بکار میرود. این ملکول اولین بار از بوفیلوس میکروپولوس گونه کنه شایع در استرالیا و کوبا جدا شد. براساس نقش مهم این مولکول در سلول های اپیتلیال روده کنه و مشخصه¬ی پنهان بودن، این گلیکوپروتئین برای ساخت واکسن (به ترتیب tickgard,gavacدرکوبا و استرالیا) برعلیه گونه کنه بوفیلوس میکروپولوس استفاده شد. به دلیل اینکه، گونه های کنه های شایع ایران با آنچه در بالا ذکرشد کاملا متفاوت می باشد، در این مطالعه تلاش شد تا با استفاده از روش ایمونولوژیکی و استفاده از منوکلونال آنتی بادی تولید شده در موسسه رازی به بررسی وجود ساختارهای مشابه با bm86 در نمونه های مختلف کنه از جمله ریپی سفالوس سانگویی ئوس، هیالوما درومداری، هیالوما آناتولیکم آناتولیکم، هیالوما مارجیناتوم بپردازیم. بدین منظور پس از تشریح کنه های ماده بالغ خونخورده و جداسازی روده میانی آنها، از سوپ سلولی هیبریدومای ضد bm86 پس از تغلیظ اولیه برای آزمون های ایمونوفلورسنت غیر مستقیم و وسترن بلات بر روی این روده ها استفاده شد. در نتیجه ساختارهای مشترکی مابین مولکول bm86 به کار رفته در واکسن gavac و مولکول های روده میانی کنه هیالوما مارجیناتوم با وزن مولکولیkda 116 و ریپی سفالوس سانگویی ئوس با وزن مولکولی 55kda بدست آمد.

چکیده ندارد.

چکیده ندارد.