نام پژوهشگر: طوبا میرزاپور

تمایز سلولهای بنیادی مزانشیمی ژله وارتون بندناف به سلولهای مشابه جرم در شرایط آزمایشگاه تحت تاثیر دوزهای مختلف bmp4
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه محقق اردبیلی - دانشکده علوم پایه 1393
  زینب عبدالهی   طوبا میرزاپور

سلول¬های زایای بدوی مسئول ادامه و تکامل گونه می¬باشند. از این رو ایجاد راهی برای تمایز و استخراج سلول-های زایا از منابع سلولی مختلف در محیط کشت، روشی با ارزش جهت انجام تحقیقات، ارزیابی مسائل اپی¬ژنتیک و درمان ناباروری می¬باشد. مهم¬ترین قسمت در تمایز یک سلول خاص، شامل تشخیص و خالص¬سازی سلول¬های بنیادی قبل از تمایز می¬باشد. لذا در این مطالعه به لحاظ مولکولی بنیادینگی سلول¬های مزانشیمی ژله وارتون با بیان ژن¬های بنیادی, cd105 cd44و cd34بررسی شد. ژن¬¬های actin,cd105،cd44 را قبل از تمایز بیان، ولی بیان ژن cd34 در آن مشاهده نشد. به منظور بررسی تکثیر و تمایز سلول¬های بنیادی بر روی نانوداربست پلیمری، نانوداربست پلیمری plla از لحاظ مناسب بودن خصوصیات سطحی، اندازه ی منافذ و نحوه¬ی توزیع منافذ، با آنالیز عکس semتوسط نرم¬افزارimage j مورد بررسی قرار گرفت. سلول¬های بنیادی مزانشیمی برروی این داربست کشت داده شدند.به منظور بررسی توان تمایزی این سلول¬ها در سطح داربست، به مدت 15روز تحت تیمار با دوزهای مختلف bmp4 قرار گرفت و روند تمایز با بررسی ژن¬های تمایزی طی روزهای 10 و 15 توسط rt-pcr مورد بررسی قرار گرفت. علاوه بر این، جهت بررسی مورفولوژی سلول¬های تمایزیافته بر روی نانوداربست، تصاویر میکروسکوپ الکترونی تهیه گردید. نتایج نشان داد کشت سلولها بر روی بستر نانوفایبر plla و دوز ng/ml bmp4 5 بیشترین خاصیت القایی را در تولید سلولهای مشابه جرم از سلولهای بنیادی مزانشیمال بند ناف دارد. به طوریکه در این شرایط سلولهایی مشابه اسپرماتوگونی تولید شدند. با توجه به بیان مثبت stra-8 پس از گذشت 15 روز از کشت اثبات شد که این سلولها درست در مرحله قبل از انجام تقسیمات میوزی که خاص سلولهای جرم می باشد هستند. طولانی¬تر کردن زمان کشت شاید به گذر سلولها از مرحله میوز منجر شود. . انجام آزمایشات تکمیلی برای اثبات دقیق تر این سلولها و بررسی dna این سلول¬ها از نظر وجود نقص های احتمالی درآینده توصیه می شود. در صورت موفقیت در تولید این سلول¬ها بافت ژله وارتون بند ناف به عنوان منبعی جهت تولید سلول زایا برای افراد مذکر نابارور معرفی می¬شود