نام پژوهشگر: داریوش مینایی تهرانی
فاطمه یزدی داریوش مینایی تهرانی
کاتالاز آنزیمی است که مسئول حذف هیدروژن پراکساید از سلول می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی تغییرات آنزیمی و سلولی کاتالاز اریتروسیت خون انسان در شرایط invitro می باشد. در این تحقیق خونگیری از انسان صورت گرفت و جهت جلوگیری از لخته شدن آن از edta استفاده شد. پس از سانتریفیوژ و جدا کردن پلاسما محلول نمک سدیم کلراید 0/01مولار جهت شکستن سلول و تهیه سوپ سلولی اضافه شد. سپس سانتریفیوژ مجدد صورت گرفت و تاثیرغلظت های متفاوت آنتاگونیست، ph و دماهای مختلف در حضور و غیاب آنتاگونیست با هم مقایسه شدند. همچنین فرآیند بررسی تغییرات ساختمانی آنزیم با استفاده از روش فلئورسانس و circular dichroism(cd) انجام شد و در نهایت بررسی جایگاه اتصال سایمتیدین به کاتالاز مورد بررسی قرار گرفت. نتایج آزمایش نشان داد که بیشترین فعالیت آنزیم کاتالاز در هر دو گروه کنترل)بدون حضور دارو( و در حضور دارو،دمای 30 درجه سانتی گراد می باشد و بهترین ph برای هر دو گروه 9 ,11= ph مشخص شد. مطالعات کینتیکی آنزیم مشخص کرد که، در حضور دارو هر دو فاکتور km و vmax آنزیم تغییر می یابد به طوریکه دارو با مهار مخلوط آنزیم را مهار نمود. مقدار ki دارو برابر با 0/45و مقدار 50ic دارو برابر با 1/58 میکرو مولار محاسبه شد. رسم منحنی آرنیوس نشان داد که انرژی اکتیواسیون در حضور و عدم حضور دارو به ترتیب kj/mol 8/31 و kj/mol 4/7 میباشد. ضریب حرارتی )40-30(q 2/ درحضور و غیاب دارو بین دمای30 و 40 درجه در حدود 1/09 و 11/1معین شد. همچنین بر طبق مطالعات داکینگ صورت گرفته بهترین محل اتصال دارو به آنزیم مشخص گردید.
شبنم دل آسود داریوش مینایی تهرانی
هموگلوبین پروتئینی است که در گلوبولهای قرمز قرار دارد و دارای هسته هم (heme) بوده و برای حمل اکسیژن تخصصی شده است. در بیماریهایی که با همولیز همراه است، اریتروسیتها تخریب شده و هموگلوبین آنها وارد خون می شود. هموگلوبین آزاد در خون برای بدن آسیب زننده بوده زیرا دارای خاصیت احیا کنندگی قوی می باشد. همچنین هموگلوبین آزاد دارای خاصیت پراکسیدازی است که میتواند با انتقال الکترون سبب ایجاد رادیکالهای آزاد در خون شود. به این خاطر مطالعه بر روی خاصیت پراکسیدازی هموگلوبین دارای اهمیت است
نگار فولادی داریوش مینایی تهرانی
چکیده ندارد.
داریوش مینایی تهرانی عزت الله کیهانی
سالمونلا تیفی موریوم یک باکتری گرم منفی میباشد که در انسا، دام و ماکیان تولید بیماری می کند. زنجیره تنفسی این باکتری در غشای داخلی آن قرار گرفته که میتواند تولید انرژی برای سلول بکند. چون تولید انرژی ارتباط مستقیم با رشد و تکثیر باکتری دارد از این نظر مطالعه زنجیره تنفسی از اهمیت زیادی برخودار است. زنجیره تنفسی در این باکتری از یکسری سیتوکروم تشکیل شده که با انواع سیتوکرومهای سلولهای اوکاریوتی تفاوت دارد. مشاهدات حضور سیتوکرومهای نوع b و سیتوکروم d را مشخص نمنود. سیتوکرومهای نوع b و 560nm دارای جذب بوده و سیتوکروم d در 630nm جذب دارند. یک شانه در ناحیه 595nm مشاهده شد که مربوط به سیتوکروم b595 میباشد. سیتوکروم d نوعی ترمینال اکسیداز است که سنتز آن به هنگام فقر اکسیژن و استرسهای غذایی و سمی در سلول افزایش می یابد. یکی از سمومی که سبب اخلال در کار سلولها و مرگ آنها میشود، سیانید پتاسیم است. در این آزمایشات برای اولین بار نشان داده شد که سلول سالمونلاتیفی موریوم قادر است حضور سیانید را در محیط رشد خود تحمدل نموده و در این محیط رشد و تکثیر کند. همچنین طیف زنجیره تنفسی سلولها در حالت in vivo افزایش سنتز سیتوکروم d را در محیط حاوی سیانید نشان میداد. در بخش دیگری از مطاعات تاثیر اتصال سیانید به سیتوکروم d را در حالت in vitro در چندین حالت از سیتوکروم d ، یعنی در سلول سالم، اسفروپلاست (سلولی که غشا خارجی و دیواره سلولی خود را از دست داده باشد)، تکه های غشای پلاسمایی و حالت محلول سیتوکروم d در دترژانت triton x -100 مورد مطالعه قرار گرفت. اتصال سیانید به حالت اکسیده سیتوکروم d سبب بوجود آمدن یک چاله در 649nm میشود. کینتیک اتصال هر یک از این حالات در شرایطی از ویسکوزیته، قدرت یونی و ph مختلف (ph 5-10) اندازه گیری شد. سرعت اتصال سیانید به آنزیم سیتوکروم d در phهای مختلف متفاوت بود و بیشینه سرعت در سلول سالم و حالت محلول در 7 ph و در اسفروپلاست و تکه های غشای در 8 ph دیده شد. در ph های قلیایی (10-9) سرعت اتصال کاهش میافت ولی کمینه سرعت در تمامی حالات در 5 ph مشاهده شد. در حالت محلول و در phهای قلیایی (9 و 10) سیتوکروم d طیف اصلی خود را از دست داده و به نظر می آید که دناتوره شده است. در قدرت یونی مختلف (0/1-1m nacl) بیشینه سرعت اتصال در غلتظهای نزدیک به ایزوتونیک نمک مشاهده شد در حالیکه کمینه سرعت در غلظت 1m نمک بدست آمد. در حالت غشای و محلول تفاوت سرعت اتصال در غلظتهای مختلف nacl چندان محسوس نبود. در شرایط ویسکوزیته مختلف (0/1- 1m sucrose) بیشینه سرعت اتصال در غلظتهای نزدیک به ایزوتونیک مشاهده شد و کمینه آن نیز در غلظت 1m سوکروز مشاهده شد. در حالتهای غشای و محلول سرعت اتصال در غلظتهای مختلف سوکروز تقریبا یکسان بود. محاسبه vmax درحالتهای مختلف بصورت: سلول سالم > اسفروپلاست > غشای > محلول، بدست آمد. محاسبه ks (ضریبی شبیه به km است و غلظتی از سیانید میباشد که در این غلظت سرعت اتصال سیتوکروم d اتصال سیانید به سیتوکروم d در سه حالت سلول سالم، اسفروپلاست و تکه های غشایی تقریبا یکسان میباشد در حالیکه در حالت محلول ks اتصال افزایشی در حدود سه برابر را نشان می دهد. این افزایش می تواند به خاطر اثراتی باشد که دتر ژانت بر روی جایگاه فعال آنزیم میگذارد.