نام پژوهشگر: ندا زابلی پیله رود

مطالعه موتاسیون های موجود در اگزون شماره یک از ژن p53 در تومورهای بافت پستان سگ به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز و تعیین توالی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تبریز - دانشکده دامپزشکی 1391
  ندا زابلی پیله رود   رضی اله جعفری جوزانی

سرطان در سگ ها به طور معمول رخ می دهد و نیازمند توجه فوری و قاطع دامپزشک می باشد. بدلیل پیشرفت در بهبود مراقبت های دامپزشکی، سگ ها تا سنین بالا زندگی می کنند که باعث شیوع بالای انواع سرطان ها در این زمان می شود. سرطان امروزه علت بیماری های منجر به مرگ در سگ ها به شمار می رود و به همین ترتیب اهمیت زیادی در جامعه بدست آورده است. فاکتورهای محیطی و ژنتیکی (آلودگی هوا، آلودگی آب، عوامل عفونی و پرتوهای یونیزه و غیریونیزه و بویژه هورمون ها و داروها، خطرات شغلی و فاکتورهای خطرساز مربوط به زندگی مثل رژیم غذایی) تاثیر زیادی روی وقوع زمان سرطان دارند. بنابراین امروزه تاکید بیشتری برروی توسعه یادگیری درباره فاکتورهای ژنتیکی و محیطی است که در سرطان های سگ سانان روی تغییرات سلولی و مولکولی تاثیر دارند. تومورهای پستان سگ سانان نصف تومورهای سگ های ماده را شامل می شود که تقریبا 50-40? از آنها به صورت بدخیم رخ می دهد، هدف از اجرای این طرح بررسی میزان موتاسیون های رخ داده در اگزون شماره یک از ژن p53در تومورهای بافت پستان سگ به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز(pcr) و تعیین توالی آنها بوده است. بمنظور اجرای این پروژه تعداد 26 نمونه بلوک پارافینه شده بافت تومور پستانی مربوط به آرشیو بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، مورد استفاده قرار گرفت. لام های تهیه شده از بلوک های پارافینه، به وسیله دستگاه میکروسکوپ نوری olympus-ch30 (ساخت ژاپن)، مربوط به بخش پاتولوژی دانشکده دامپزشکی تبریز، به منظور تایید وجود تومور و تشخیص نوع تومور، مورد مشاهده قرار گرفتند و تصاویر مربوط به لام ها، بوسیله دوربین olympus dp12,u-tvo.5xc-2(japan). تهیه شد. پس از برش و استخراج dna به 2 روش جوشاندن و استفاده از کیت ژل سیلیکا و پس از ارزیابی غلظت dna موجود، با روش pcr و تعیین توالی dna مورد بررسی قرار گرفت. پس از تکثیر بخشی از ژن p53، محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز، تعیین توالی شد. این محصول با وزن حدود 500 جفت باز به روش 2طرفه سنجر تعیین توالی شد. نتایج سکانس کردن با استفاده از نرم افزارهای blast مورد جستجوی همانندی نوکلئوتیدی قرار گرفت. نتایج حاکی از شباهت بسیار زیاد توالی های بدست آمده با بخشی از ژن p53 ثبت شده در بانک جهانی ژن می باشد. توالی های بدست آمده به شکل in silico مورد ترجمه قرار گرفت و نتایج همانندی توالی اسیدهای آمینه، توسط نرم افزارهای موجود در سایت expasy مورد مقایسه قرار گرفت. در تمامی نمونه ها یک موتاسیون به شکل اضافه شدن یک توالی ممتد 27 اسیدآمینه ای در فاصله بین اسید آمینه های 30-57، مشخص شد.