نام پژوهشگر: مژده صالح‌نیا

اثر سلنیوم بر میزان گونه های واکنش گر اکسیژنی حاصل از کشت فولیکول های پره آنترال تخمدان های انجماد شیشه ای شده موش با دو روش رایج و پوشش مستقیم
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی 1388
  علی عابدالهی   مژده صالح نیا

تغییر شرایط فیزیکی و شیمیایی بافت تخمدانی و عملکردی آن در طی پروسه انجمادی و بلوغ آزمایشگاهی موجب اکسیداتیو استرس می شود. برای جلوگیری از تشکیل اکسیداتیو استرس، آنتی اکسیدان استفاده می شود و سلنیوم به عنوان بخش ضروری تعدادی از آنتی اکسیدان های آنزیمی شناخته شده است. اندازه گیری گونه های واکنش گر اکسیژنی و ظرفیت آنتی اکسیدان کل ابزار مفید برای ارزیابی شرایط کشت است. تخمدان های موش nmari 14-12 روزه پس از جمع آوری برای گروه های آزمایشی زیر بکار گرفته شدند: آزمایش اول : مقایسه انجماد شیشه ای پوشش مستقیم با استفاده از غلظت های 4 ، 6 و 8 مول با انجماد شیشه ای رایج و برای هر گروه تست سمیت مربوطه در نظر گرفته شد. پس از انجماد – ذوب درصد زنده ماندن فولیکول های پره آنترال جدا شده، مورفولوژی و فراساختاری تخمدان ها مطالعه شد. آزمایش دوم : فولیکول های پره آنترال جدا شده در tcm199 در حضور غلظت های مختلف سدیم سلنیت (0 ، 5 ، 10 و 15 نانوگرم بر میلی لیتر) و سرم آلبومین گاوی (3 میلی گرم بر میلی لیتر) و یا سرم جنین گاوی (5 درصد) کشت شدند و سپس القاء تخمک گذاری با 5/1 واحد بر میلی لیتر گنادوتروپین جفتی صورت پذیرفت. درصد زنده ماندن، قطر فولیکول ها و تشکیل آنتروم و همچنین قطر و تکوین تخمک ها و تکوین جنینی ارزیابی شد. آزمایش سوم : میزان ros تولید شده در فولیکول های پره آنترال جدا شده از تخمدان منجمد شده و نشده پس از 0 ، 12 ، 24، 48 ، 72 و 96 ساعت کشت در حضور غلظت های مختلف سدیم سلنیت ارزیابی شد. همچنین ظرفیت آنتی اکسیدان کل و میزان فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز بررسی شد. نتایج آزمایش اول نشان داد که میزان زنده ماندن و مورفولوژی طبیعی فولیکول های اولیه و پره آنترال حاصل از گروه انجمادی رایج بالاتر از گروه حاصل از پوشش مستقیم بود (p<0.001) و ساختار فولیکول ها در گروه انجمادی رایج مشابه گروه غیرانجمادی کاملاً حفظ شده بود، اما تعدادی علائم دژنراسیون در فولیکول های حاصل از گروه انجمادی پوشش مستقیم مشاهده شد.نتایج آزمایش دوم نشان داد که میزان زنده ماندن فولیکول های کشت شده در حضور سرم جنین گاوی و غلظت های 5 و 10 نانوگرم بر میلی لیتر سدیم سلنیت (به ترتیب 23/88 و 83/90 درصد) بالاتر از گروه های دیگر بود (به ترتیب p<0.05 و p<0.001).میانگین قطر فولیکول ها (58/15 ± 84/199 میکرومتر) و درصد تخمک های متافاز دوم (08/33 درصد) در فولیکول های کشت شده در حضور سرم جنین گاوی و غلظت 10 نانوگرم بر میلی لیتر سدیم سلنیت بالاتر بود.نتایج آزمایش سوم نشان داد که تولید گونه های واکنش گر اکسیژنی در فولیکول های پره آنترال حاصل از تخمدان منجمد شده و نشده پس از 24 ساعت کشت افزایش یافت و ظرفیت آنتی اکسیدان کل و فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز وابسته به سلنیوم کاهش یافت (p<0.005) ، در حالیکه در حضور سدیم سلنیت میزان گونه های واکنش گر اکسیژنی کاهش و فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز وابسته به سلنیوم و ظرفیت آنتی اکسیدان کل پس از 96 ساعت کشت این فولیکول ها افزایش یافت و تفاوت معنی داری بین فولیکول های پره آنترال حاصل از تخمدان منجمد شده و نشده مشاهده نشد. میزان گونه های واکنش گر اکسیژنی در فولیکول های پره آنترال کشت شده ارتباط منفی با ظرفیت آنتی اکسیدان کل و فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز داشت. به طور کلی نتایج نشان داد که فولیکول های کشت شده در حضور سرم جنین گاوی و غلظت 10 نانوگرم بر میلی لیتر سدیم سلنیت، بلوغ و رشد بهتری داشتند و این اثرات با کاهش میزان گونه های واکنش گر اکسیژنی تولید شده و یا افزایش فعالیت گلوتاتیون پراکسیداز و ظرفیت آنتی اکسیدان کل در طی کشت مداخله می شود

الگوی بیان اینتگرین ها و لیگاند آنها (استئوپونتین) در آندومتر موش پس از تجویز استروژن و پروژسترون
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس 1388
  فاطمه پیغمبری   مژده صالح نیا

لقاح، لانه گزینی و تشکیل جفت رویدادهای دینامیکی هستند که در آنها ارتباطات پیچیده سلول ها مطرح می گردند. برخی از گلیکوپروتئین های عرض غشاء از جمله اینتگرین ها به عنوان رسپتور اجزای ماتریکس عمل می کنند. این مولکول ها در اتصال سلول ها به ماتریکس خارج سلولی و تسهیل مهاجرت سلولی نقش دارند و در تمام مراحل باروری، لقاح، لانه گزینی و تکوین جفت مداخله می کنند. هدف از این مطالعه بررسی بیان ژنهای اینتگرینی αv ، β3 ، α4 و β1 و لیگاند آنها استئوپونتین در موشهای فاقد تخمدان و تحت درمان با هورمون های تخمدانی در مقایسه با موش های نرمال بود. همچنین مطالعه فراساختار آندومتر و ارتباط بروز پینوپودها با بیان ژنهای اینتگرینی ذکر شده نیز از دیگر اهداف تحقیق حاضر بود. در گروه واجد تخمدان فازهای مختلف هر سیکل تعیین و نمونه برداری از 1:3 میانی رحم انجام شد و در گروه فاقد تخمدان پس از مطالعه مقدماتی بر مبنای سه معیار بافتی ارتفاع اپی تلیال، تعداد غدد و قطر غدد، روز دوم به عنوان بهترین روز نمونه برداری انتخاب شد و پس از کشتن موشها نمونه های بافتی از 1:3 میانی رحم تهیه شد سپس بروز اینتگرین های مختلف با دو تکنیک ایمونوهیستوشیمی و real time rt-pcr بررسی شد. همچنین فراساختار آندومتر گروه فاقد تخمدان با دو تکنیک sem و tem بررسی شد. نتایج تحقیق حاضر نشان داد در موشهای واجد تخمدان مولکول های مورد نظر opn αv ، β3 ، α4 و β1 در کلیه فازهای مختلف سیکل استروس دیده شد و فقط در فاز مت استروس در سطح پروتئین نیز این مولکول ها مشاهده شدند. همچنین در گروه موشهای فاقد تخمدان تحت درمان بیان مولکول های مدنظر هم در سطح ژن و هم در سطح پروتئین در گروه های تحت درمان پروژسترون دیده شد ولی در گروه تحت درمان استروژن فقط در سطح ژن این مولکول ها مشاهده شدند. از نظر فراساختاری بین گروه های مورد مطالعه در موشهای فاقد تخمدان تفاوتی مشاهده نشد و در عین حال بروز پینوپودها تنها در گروه تحت درمان با پروژسترون ملاحظه شد و ارتباط خاصی بین بروز پینوپودها با بیان ژن های اینتگرینی دیده نشد. در مجموع تحقیق حاضر نشان داد که تأثیر هورمون پروژسترون در مقایسه با استروژن بر بیان اینتگرین ها در اندومتر بیشتر بوده و اختلاف در الگوی بیان این مولکول ها در سطوح مختلف اندومتر اهمیت و الویت آنها را در پدیده لانه گزینی نشان می دهد.