نام پژوهشگر: [email protected] خواجه

بررسی اثر hsp90 ? انسانی درشکل فضایی و ایمنی زایی پروتئینهای core ویروس hcv وhbsag ویروس hbv
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری - پژوهشکده محیط زیست 1388
  مژگان بنده پور   بهرام کاظمی

در سراسر دنیا بیش از 500 میلیون نفر به هپاتیتهای b و c مبتلا هستند. حتی گزارشاتی مبنی بر ابتلای افراد واکسینه به هپاتیت b نیز در نقاط مختلف وجود دارد. از طرفی با توجه به اینکه واکسن مناسبی بر علیه هپاتیت c وجود نداشته و یکی از مسائل مهم در پروژه واکسن ، یافتن ادجوانتی موثر و مناسب در واکسنهای انسانی است ،در این تحقیق خاصیت چپرونی و ادجوانتی پروتئین ساب یونیت بتایhsp90 انسانی مورد بررسی قرار گرفت. به این ترتیب که ژن پروتئین های coreویروس هپاتیت c و hbsag ویروس هپاتیت b در وکتور petduet-1 کلون شدند و از وکتور pgp1-2 حاوی ژن t7 rna polymerase برای بیان پروتئین شوک حرارتی hsp90انسانی استفاده گردید. تلفیقی از سه پروتئین core، hbsagو hsp90 به موشهای balbc تزریق شد و بعد از یک هفته سرم آنها از نظرمیزان total igg و igg2a بررسی گردید. دو هفته بعد از تزریق یادآور ، لنفوسیتهای غدد لنفاوی inguinal ،popliteal وطحال از نظر proliferation و ترشح سایتوکاینها در شرایطin vitro و ex vivo مورد بررسی قرار گرفتند. بعد از مطالعه سیستم ایمنی هومورال و سلولی حیوان وهمچنین ساختمان دوم پروتئینهای مذکور به این نتیجه رسیدیم که کمپلکسهای core/hbsag+hsp وcore+hbsag+hsp تولید total igg و igg2a را تحریک کردند. همخوانی proliferation لنفوسیتهای طحال با میزان igg2a بالا بود و پایداری آن در نوبت دوم خونگیری مشاهده گردیدو اختلاف آن با کمپلکسهای حاوی ادجوانت فروند معنی دار می باشد. ابتدا افزایش هر دو سایتوکاین il-4 و il-5را شاهد بودیم که نشانه تحریک سیستم ایمنی هومورال می باشد بدنبال آن کاهش il-4 نشانه عدم ایجاد ازدیاد حساسیت بود. تاثیر چپرون hsp در ساختمان پروتئینهای core وhbsag با cd و فلورومتر بررسی گردید که مشخص شد تاثیر آن بصورت پیچش صحیح پروتئینهای مذکور بعد از unfolding در اثر حرارت می باشد .