نام پژوهشگر: عاتکه رهنما

ارزیابی بیان ژن bdnf در سلول های اندومتر رحم گوسفند
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده دامپزشکی 1389
  عاتکه رهنما   پژمان میرشکرایی

نوروتروفین ها (neurotrophins) خانواده ای از پروتئین ها هستند که باعث القای بقا، گسترش و عمل نورون ها می شوند. نوروتروفین ها شامل 4 عضو می باشند که از نظر ساختاری با هم ارتباط دارند و شامل ngf(nerve growth factor)، bdnf(brain drieved neurotrophic factor)، (neurotrophin-3) 3-nt، nt4(neurotrophin-4) می باشند. ngf اولین فاکتور نوروتروفیک شناخته شده ی مترشحه از بافت عصبی است که برای بقا و حفظ اعصاب سمپاتیک و حسی مهم است. bdnf دومین فاکتور نوروتروفیک شناخته شده و یکی از فعال ترین نوروتروفین ها می باشد که در سیستم های عصبی و تولید مثل نقش های مهمی را ایفا می کند. به منظور ارزیابی میزان بیان ژن bdnf در سلول های اندومتر رحم گوسفند، 5 رحم آبستن و 5 رحم غیرآبستن میش بلافاصله از کشتار گاه به پژوهشکده ی جنین دام دانشگاه شهرکرد منتقل شد و بعد از جداسازی لایه ی اندومتریال از سرویکس، پلاسنتوم، بین پلاسنتومی، آمپولا و ایستموس تا زمان آزمایش در ازت مایع نگهداری شد. rna ی کل نمونه ها استخراج شد و سپس با استفاده از روش کپی برداری معکوس، cdna تهیه شد و واکنش زنجیره ای پلی مراز با استفاده از cdna ی تهیه شده پرایمرهای اختصاصی bdnf و gapdh (ژن کنترل داخلی) انجام شد. محصول pcr در ژل آگاروز 2% تحت الکتروفورز قرار گرفت و توسط اتیدیوم بروماید (?g/ml1) رنگ آمیزی شد. دانسیته ی باندها با استفاده از نرم افزار کامپیوتری photo-capt v.99 imageتعیین شده و دانسیته ی نسبی به صورت نسبت bdnf به gapdh بیان گردید. نتایج این مطالعه نشان داد که اختلافات معنی داری در بیان ژن bdnf بین ایستموس آبستن و غیر آبستن، سرویکس آبستن و غیر آبستن، بین پلاسنتوم آبستن و غیر آبستن وجود داشت در حالی که اختلافات بین پلاسنتوم آبستن و غیر آبستن، آمپولای آبستن و غیر آبستن معنی دار نبود. همچنین نتایج ما حاکی از آن بود که در رحم آبستن، اختلافات معنی داری در بیان ژن bdnf تنها در بین پلاسنتوم و بین پلاسنتوم و نیز پلاسنتوم و آمپولا وجود دارد، در حالی که در رحم غیر آبستن بین قسمت های مورد مطالعه در رحم اختلافات معنی داری وجود نداشت. واژگان کلیدی: نوروتروفین ها، bdnf، اندومتر رحم، گوسفند، pcr rt-، الکتروفورز.