نام پژوهشگر: مریم نادری لردجانی

ساخت الکترود اصلاح شده با نانو ذرات جهت تعیین هیبریداسیون dna
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه یزد 1389
  مریم نادری لردجانی   محمد مظلوم اردکانی

زیست حسگر های هیبریداسیون dna دارای پتانسیل بالقوه ای برای تشخیص بیماری ها، آزمایش داروها و دیگر کاربرد های زیستی می باشند. در این میان زیست حسگرهای dna ای که بر پایه روش های الکتروشیمی کار می کنند، به علت سادگی، سریع و ارزان بودن و هم چنین حساسیت بالا مورد توجه ویژه ای قرار گرفته اند. هدف از این تحقیق بررسی و تعیین هیبریداسیون dna با روش های الکتروشیمیایی می-باشد. بدین منظور نانو ذرات طلا ساخته شدند. سپس مخلوطی از نانو ذرات طلا و dna تیموس گوساله توسط روش ولتامتری چرخه ای بر سطح الکترود آزمایش گردید و به منظور اصلاح الکترود کربن شیشه ای مورد استفاده قرار گرفت. کاوشگر مورد استفاده در این تحقیق برای ژن ناحیه تعیین کننده جنسیت بر روی کروموزومy (sry) طراحی شد و انتهای ?5 آن با گروه sh تغییر یافت. این کاوشگر بر سطح الکترود اصلاح شده متصل شد، سپس با اضافه کردن متیلن بلو به عنوان شناساگر سطح به آن الکتروفعال گردید. هیبریداسیون این کاوشگر با dna تک رشته ای شده مکمل و غیر مکمل حاصل از pcr مورد آزمایش قرار گرفت و توسط روش ولتامتری پالس تفاضلی بررسی گردید. نتایج نشان می دهند که الکترود اصلاح شده قادر به انجام هیبریداسیون و تشخیص dna تک رشته ای شده مکمل از غیر مکمل می باشد. ppm 30 به عنوان غلظت بهینه dna تک رشته ای شده مکمل برای انجام هیبریداسیون به دست آمد. برای بررسی نمونه های ژنومی، dna ژنومی افراد مذکر و مونث نیز جهت هیبریداسیون مورد آزمایش قرار گرفتند. در نهایت پایداری اتصال موثر dna تک رشته ای کاوشگر بر سطح الکترود اصلاح شده توسط واسرشتگی با محلول قلیایی و واسرشتگی گرمایی بررسی گردید.