عفونت با باکتری escherichia coli o157:h7 می تواند منجر به اسهال خونی یا سندرم اورمی همولیتیک با آسیب کلیوی (بیماری نادر اما کشنده) شود. پروتئین های intimin ، tir و espa فاکتورهای بیماری زای بیان شده توسط لوکوس lee باکتری e.coli انتروهموروژیک هستند. این باکتری به پروتئین espa به عنوان رابطی برای انتقال tir به سلول میزبان نیاز دارد و intimin در سطح قرار می گیرد که باکتری را به tir منتقل شده متصل می کند. در این تحقیق dna واکسن متشکل از ژن های eae, tir و espa برای بررسی ایمنی زایی مورد تزریق قرار گرفتند. ژن مولتی مر برو روی سه وکتور یوکاریوتی paav-mcs-gfp و pci-neo و pegfp-n1 کلون شد. paav-mcs-gfp و pegfp-n1 برای بررسی بیان ژن در سلول های t.293 مورد استفاده قرار گرفتند. و دو وکتور paav-mcs-gfp و pci-neo و به عنوان dna واکسن به کار رفتند. گروه های تست چهار بار با 50 میکروگرم paav-mcs-gfp و pci-neo مورد تزریق درون ماهیچه ای قرار گرفتند. موش های کنترل تحت همان شرایط وکتور pci-neo و pbs دریافت کردند. خون گیری قبل از تزریقات انجام شد. تیتراسیون سرم نشان داد که موش های balb/c تست تزریق شده با dna واکسن در مقایسه با گروه های کنترل به طور موفقیت آمیزی ایمن شده اند و در چالش با باکتری e.coli o157:h7 به صورت دهانی، محافظت نشان دادند. وکتورهای حاضر dna واکسنی بوجود آوردند که ایمنی محافظتی را به تنهایی یا در ترکیب با دیگر شیوه ها ایجاد می کنند. روش کار به شرح زیر بود: 1- طراحی وسنتز ژن نوترکیب وپرایمرهای اختصاصی آن 2- همسانه سازی قطعه ی موردنظر در وکتور dna واکسن و تراریخت نمودن آن در میزبان موقت 3- تخلیص وکتور همسانه سازی شده از میزبان موقت به مقدار زیاد 4- تزریق آن به موش وسنجش ایمنی زایی از طریق الایزا 5- خوراندن باکتری e.coli o157:h7 به موش و بررسی ایمنی زایی dna واکسن 6- انتقال وکتور dna واکسن به سلولهایt293 در محیط کشت و بر رسی بیان با استفاده از مارکر فلورسانس gfp که در زیر میکروسکوپ فلورسانت به رنگ سبز فسفوری دیده می شود.