نام پژوهشگر: حسین میرهندی

استفاده از پلی مورفیسم طولی نواحی its1 وits2 موجود در dna ریبوزومی جهت تعیین گونه ی مخمرهای بیماریزای انسان براساس الگوی الکتروفورزی محصولات pcr
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده علوم پایه 1391
  لادن کریمی   حسین میرهندی

گونه های مخمری نقش مهمی را در مرگ و میر بیماران دارای نقص ایمنی ایفا می کنند. در مطالعه حاضر از پلی مورفیسم قطعات طولی internal transcribed spacer موجود در dna ریبوزومی برای شناسایی مهمترین و شایع ترین گونه های مخمری پزشکی از میان نمونه های بالینی استفاده شده است. نواحی its1 و its2 214 سوش قارچی شامل 30 سوش استانداردو 184 نمونه بالینی توسط روش pcr با استفاده از دو جفت پرایمر (its1-its2) و (its3-its4) به طور مجزا تکثیر شدند. محصولات pcr بدست آمده از تکثیر دو ناحیه به طور مساوی با هم مخلوط شدند و الگوی الکتروفورزی آنها بر روی ژل آگاروز با توجه به اندازه نواحی its استخراج شده از بانک ژنی بررسی شد. اکثر نمونه های بالینی الگوی fsp مشابه با الگوی پیش بینی شده از آنالیز تواالی های بانک ژنی را نشان دادند. شایع ترین گونه های مخمری عامل عفونت نظیر کاندیدا آلبیکنس، کاندیدا تروپیکالیس، کاندیدا گلابراتا، کاندیدا کفیر، کاندیدا کروزه ای، کاندیدا لوزیتانیا و کاندیدا گلیرموندی با روش pcr-fsp قابل شناسایی هستند. اندازه نواحی its1 و its2 برای گونه های بیماریزای قارچی به اندازه کافی متفاوت است و موجب شناسایی نمونه های بالینی توسط الگوی اختصاصی الکتروفورز ژل آگاروز می شود.با این روش قادر به شناسایی و تمایز تقریبا تمامی مخمرهای پاتوژن حدود 35 گونه مخمری بدون استفاده از ابزار گران قیمت نظیر تعیین توالی و الکتروفورز مویینه می باشیم. این متد روشی ساده برای بکارگیری در تحقیقات مولکولی در جهت شناسایی تعداد بسیاری از گونه های مخمری می باشد و همچنین برای اهداف تشخیصی در آزمایشگاههای مرجع و مطالعات اپیدمیولوژیک کاربرد دارد.