نام پژوهشگر: سعید سفلایی شهربابک

کلونینگ و بیان ژن kmp-11 لیشمانیا اینفانتوم در وکتور بیانی pcdna3
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی 1390
  سعید سفلایی شهربابک   عبدالحسین دلیمی اصل

لیشمانیا از جمله بیماری های قابل انتقال بین انسان و حیوان می باشد و از نقاط مختلف جهان گزارش می شود. لیشمانیوز احشائی در 47 کشور جهان شیوع دارد و میزان بروز سالیانه آن در دنیا 500 هزار نفر تخمین زده شده است که 70 تا 80 هزار مورد مرگ و میر سالیانه در اپیدمی های گسترده در هند و سودان گزارش می شود. در ایران در حال حاضر کالاآزار حداقل در برخی از مناطق چند استان کشور( فارس، اردبیل، آذربایجان شرقی، بوشهر) به صورت اندمیک دیده می شود. لیشمانیوز احشایی در ایران توسط لیشمانیا اینفانتوم ایجاد می گردد و این بیماری در ایران بیشتر در کودکان سنین زیر 10 سال به خصوص 6 ماهه تا 2 ساله دیده می شود. به دلیل اهمیت این بیماری ایجاد راه درمانی و یا راه پیشگری موثر از این بیماری ضروری است. بحث واکسن های نوترکیب موضوعی کاملا جدید می باشد و روش قدرتمندی برای القای مناسب سیستم ایمنی سلولی و همورال است واکسیناسیون ژنی پاسخ های ایمنی موثر و طولانی مدتی ایجاد می کند. ژن پروتئین غشای کینتوپلاستید (kinetoplastid membrane protein) kmp-? در تمام گونه های خانواده کینتوپلاستید وجود دارد. این ژن کاملا محافظت شده است و دچار تغییر نمی شود و هم چنین پروتئین حاصل از این ژن باعث القای بسیار بالای سیستم ایمنی سلولی از نوع th1 می شود که واکسن حامل این ژن و بیان آن در بدن می تواند در پیشگیری از این بیماری موثر باشد. در این تحقیق این ژن از ژنوم لیشمانیا اینفانتوم سویه ایرانی (mhom/tn/80/ipi1) جدا و تکثیر شد و طی دو مرحله کلونینگ این ژن(bp279) در وکتور بیانی یوکاریوت pcdna3 کلون گردید و توسط باکتری تکثیر شد. با تعیین توالی این ژن و مقایسه آن با سویه های دیگر انگل مشخص گردید که این ژن در تمام انواع لیشمانیا یکسان می باشد سپس بیان ژنی این ژن (kd11) در درون سلول یوکاریوت cho و توسط تکنیک rt-pcr تایید گردید.