امروزه، برای بارور کردن گاو ماده از اسپرم ذخیره شده در شرایط سرما و بویژه اسپرم منجمد استفاده می شود. برای ذخیره سازی و افزایش تعداد دُز اسپرم، استفاده از مایع رقیق کننده امری اجتناب ناپذیر است. مطالعات زیادی نشان داده اند که سرما و انجماد باعث وارد شدن آسیب های متعدد و کاهش میزان باروری اسپرم می شود و به حداقل رساندن این تغییرات در خصوصیات اسپرم سبب بهبود باروری در گاو خواهد شد. بنابراین ماهیت رقیق کننده و ترکیبات آن بایستی به گونه ای باشد که بتواند تغییرات خصوصیات اسپرم را در شرایط سرما (c°5) و انجماد (c°196-) به حداقل برساند. لذا این مطالعه با هدف بررسی تأثیر افزودن اسیدهای چرب غیراشباع اُمگا-3 و ترکیبی از اسیدهای اُمگا-3،6،9 به رقیق کننده در سه سطح 1،5/2 و 5 درصد بر خصوصیات اسپرم گاو (پارامترهای حرکتی، زنده مانی و مورفولوژی) در شرایط سرما و انجماد انجام شد. برای امولسیفیه کردن این اسیدهای چرب در رقیق کننده از حلال پلی اتیلن گلیکول (به عنوان مناسب ترین حلال) استفاده شد و محلول نهایی با دستگاه سونیکاتور سونیکه شد. در این طرح از 5 رأس گاو بالغ برای اسپرم گیری و در هر گروه آزمایشی 12 پایوت مورد ارزیابی قرار گرفت. برای تجزیه و تحلیل آماری از نرم افزار spss نسخه 16 و آزمون آماری repeated measure anova و برای مقایسه دوتایی گروه ها از تست bonferroni استفاده گردید. همانطور که مورد انتظار بود، سرما و بویژه انجماد مقادیر پارامترهای مورد ارزیابی را کاهش داد و نتایج نشان داد که نه تنها اسیدهای چرب غیراشباع افزوده شده در مقادیر مختلف قادر به بهبود خصوصیات اسپرم در شرایط سرما و انجماد نبودند بلکه در برخی پارامترها و بویژه در سطوح 5/2 و 5 درصد اثرات نامطلوبی را نیز به همراه داشتند و باعث کاهش کیفیت اسپرم شدند (p<0/05). مقایسه نتایج حاصل از دو گروه متفاوت اسیدهای چرب نشان داد که اثرات محافظتی ترکیب اسیدهای چرب غیراشباع اُمگا-3،6،9 در مقایسه با اُمگا-3 کمتر و اثرات نامطلوب آنها بیشتر بود.