نام پژوهشگر: بهاره محمدی کرماجی

ارزیابی میزان اعتبار روش آنالیز توپیرامات در سرم انسان بوسیله hplc پس از مشتق سازی با fmoc با روش lc-ms/ms
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان همدان - دانشکده علوم پایه 1391
  بهاره محمدی کرماجی   غلامرضا بهرامی

مانند دیگر قندها و مشتقات آنها , توپیرامات گروه کروموفوری که در بالاتر از 1?? نانومتر جذب داشته باشد , ندارد و به همین دلیل آنالیز این دارو در خون انسان پیچیده و مشکل است, ( بهرامی , ???? , ??? – ??? و استیسلوزالاسیک , ????, ??? – ??? ) و در آنالیز توپیرامات با کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا, نمی توان از آشکارساز ماوراء بنفش که آشکارساز رایج و در دسترسی است, استفاده نمود. در حالیکه در روش اندازه گیری توپیرامات با کروماتوگرافی گازی آشکارساز نیتروژن فسفوروس استفاده شده است. ( ریفیتس , ????, ??? – ??? ) روش موجود برای استخراج دارو از نمونه های سرم انسانی روشی زمانبر است و در منحنی کالیبراسیون حداقل غلظت سنجیده شده توپیرامات ??? نانوگرم در میلی لیتر میباشد. به منظور اندازه گیری توپیرامات با کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا میتوان به استفاده از آشکارساز های نیتروژن کمی لومی نسانس و شاخص انکساری اشاره نمود. (استیسلوزالاسیک , ????, ??? – ??? و دونگ , ????, ?? -7? و بیرو , ????, ??7 – ??? ) در روش کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا کوپل شده با clnd به دلیل اینکه توپیرامات دارای اتم نیتروژن میباشد و اساس کار این آشکارساز حضور این اتم در ماده آنالیت است بررسی توپیرامات میسر میگردد. البته این روش در محیط سرم آزمایش نشده و تنها به منظور بررسی توپیرامات در قرص آن استفاده شده است. حداقل غلظت در منحنی کالیبراسیون ?? نانوگرم در میلی لیتر میباشد. روش کروماتوگرافی مایع با کارآیی بالا کوپل شده با آشکارساز ridنیز در نمونه های قرص توپیرامات بکار رفته و از حساسیت چندانی برخوردار نیست. بکارگیری آشکارساز ماوراء بنفش به صورت غیرمستقیم در الکتروفورز برای آنالیز توپیرامات گزارش شده است. در این روش مینیمم غلظت آشکار شده در نمونه های سرم انسانی ??? نانوگرم در میلی لیتر گزارش شده است. (ماندریولی , ????, ???? – ???? ) آشکار سازی توپیرامات با آشکارساز فلورسانس, پس از مشتق سازی با عوامل فلورسان به آسانی میسر می شود, از جمله میتوان به سه ماده فلورسان: ?- فلورونیل متیل کلروفرمات و?- کلرو – ? – نیتروبنزوفورازان و دنسیل کلراید اشاره نمود که طی واکنش مشتق سازی با توپیرامات, این ماده را توسط دتکتور فلورسانس قابل ردیابی میسازند. ( مرکولینی , ????, ?? – ?7 و بهرامی ,???7, ??? – ??? و بهرامی ,????, ?7? – ?8? ) در روش مشتق سازی توپیرامات با دنسیل کلراید حداقل غلظت آشکار شده در منحنی کالیبراسیون 1 میکروگرم در میلی لیتر بوده است. دنسیل کلراید ماده مشتق سازی است که طول موج تحریک آن ??? نانومتر و طول موج نشر آن ??? نانومتر است. در این روش برای استخراج توپیرامات از سرم از روش استخراج فاز جامد استفاده میشود که روش گران قیمتی میباشد. در روش مشتق سازی با ?- کلرو – ? – نیتروبنزوفورازان حداقل غلظت آشکار شده در منحنی کالیبراسیون 1? نانوگرم در میلی لیتر گزارش شده و استخراج مایع – مایع توپیرامات با حلال آلی دی کلرو متان از سرم به راحتی انجام شده است. طول موج تحریک ?- کلرو – ? – نیتروبنزوفورازان برابر ??? نانومتر و طول موج نشر آن برابر ??? نانومتر میباشد. در روش مشتق سازی با ? - فلورونیل متیل کلروفرمات که در این پایان نامه توسط دستگاه طیف سنج جرمی مورد بررسی قرار گرفته است, حداقل غلظت گزارش شده توپیرامات ?? نانوگرم در میلی لیتر میباشد و استخراج مایع - مایع توپیرامات از سرم با حلال آلی دی کلرو متان صورت گرفته است. طول موج تحریک ? - فلورونیل متیل کلروفرمات برابر ??? نانومتر و طول موج نشر آن برابر ?1? نانومتر میباشد. البته در صورت مشتق سازی با ? - فلورونیل متیل کلروفرمات علاوه بر آشکارساز فلورسانس, میتوان از آشکارساز ماوراء بنفش نیز برای اندازه گیری توپیرامات استفاده نمود, زیرا ماده حاصل پس از مشتق سازی توپیرامات و fmoc-cl دارای جذب ماوراء بنفش نیز میشود, که این جذب در ??? نانومتر ظاهر میگردد. حداقل غلظت آشکار شده در این روش ?? نانوگرم در میلی لیتر گزارش شده است. ( بهرامی, ????, ??? – ??? ) چندین روش آنالیز با طیف سنج جرمی برای اندازه گیری توپیرامات گزارش شده است. ( کانتین , ????, ??? – ??7 و پیفیرو لوپز , ????, ??? – ??7 و متر , ????, 7?? – 7?? و لا مارکا , ????, ???? – ????) روشهای دیگر آنالیز توپیرامات به همراه متابولیتهایش با طیف سنج جرمی نیز گزارش شده است. ( بریتزی , ????, ??? – ??? و بریتزی, ????, ?78 – ?8? و میم رود , ????, ???? – ???? ) همانطور که می دانیم طیف سنج جرمی وسیله ای گران قیمت و هزینه بر میباشد و به منظور اندازه گیری با این دستگاه به افراد متخصص در این زمینه نیاز هست.