نام پژوهشگر: محسن پولادیان

بیان ژن متالوتیونین در باکتری اشریشیا کولی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شهرکرد - دانشکده علوم 1391
  محسن پولادیان   بهناز صفار

سوال اساسی تحقق این بود که آیا می توان ژن متالوتیونین smta را در باکتری e. coli مورد بیان قرار داد. بدین منظور ژن متالوتیونین smta که مربوط به یک سیانوباکتری بود به کمک سنتز تسهیل شده ژن به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز مورد ساخت قرار گرفت. سپس به درون وکتور کلونینگ ptz57r/t که از وکتورهای t/a-cloning محسوب می شود وارد گردید و بدین وسیله در سویه کلونینگ dh5? کلون گردید. در ادامه به وکتور بیانی pet15b(+) وارد شد و از این طریق در درون میزبان باکتریایی بیانی bl21(de3) مورد بیان قرار گرفت. القای بیان ژن توسط iptg در باکتری های bl21(de3) انجام شد. مقایسه الگوی بیان پروتئینی باکتری نوترکیب در ساعات مختلف بعد از القا نسبت به قبل از القا باند حدود 10 کیلودالتونی را نشان داد، که می تواند نشان دهنده بیان پروتئین مورد نظر باشد. بدین ترتیب راهی به سوی تولید و خالص سازی این پروتئین و استفاده های بعدی آن در آینده باز خواهد شد.