نام پژوهشگر: محسن علیزاده ملایعقوب

اختصاصیت و حساسیت آنتی بادی سرمی در عفونت acinetobacter baumannii بر علیه یک پروتئین نوترکیب از نواحی حفاظت شده ژن bap آن باکتری
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه شاهد - دانشکده علوم پایه 1391
  محسن علیزاده ملایعقوب   ایرج رسولی

acinetobacter baumannii به عنوان یک باکتری بیماریزای بیمارستانی که دارای مقاومت به بسیاری از انواع آنتی بیوتیک ها می باشد، به حساب می آید. از این رو، یک روش تشخیصی سریع، حساس، اختصاصی و به صرفه، برای شناسایی آن ضروری به نظر می رسد.وجود این میکروارگانیزم هنوز با استفاده از روش های سنتی کشت مشخص می شود و شناسایی آن نیز از طریق روش های بیوشیمیایی. روش سنتی ذکر شده، زمان بر بوده و برای اعلام نتیجه، حداقل 2 الی 5 روز طول می کشد.تشخیص دیر هنگام این باکتری در بیماران منجر به بروز مشکل در کنترل بیماری شده و می تواند منجر به درگیری شدید در مراقبت از بیمار و مدیریت بیماری او گردد. برای یافتن یک روش تشخیصی سریع، نیاز به یک آنتی ژن اختصاصی می باشد و پروتئین های غشاء خارجی از اولین کاندیدها هستند. در این مطالعه یک اپی توپ 371 آمینواسیدی از پروتئین سطحی bap (biofilm associated protein ) در اسینتوباکتر بومانی که قبلا توسط آقای فتاحیان کلون شده بود، ساب کلون گردید و این پروتئین نوترکیب به صورت خالص به دست آمد. بعد از بررسی های بیوانفورماتیکی،پروتئین های سطحی موجود در با کتری های پاتوژن salmonella enteritidis وstaphyloccocus aureus ، بیشترین شباهت به پروتئین نوترکیب bap را نشان دادند و در نتیجه برای بررسی های بیشتر انتخاب شدند. pseudomonas aeruginosa به عنوان یک باکتری با توانایی بالا در تشکیل بیوفیلم انتخاب گردید.گروه هایی از موش های نژاد balb/c انتخاب شدند و توسط سلول کامل a.baumannii, s.aureus, s.enteritidis, p.aeruginosa تزریق شدند. از موش های ایمن شده با پروتئین نوترکیب bap نیز به عنوان کنترل مثبت استفاده شد. در نهایت به منظور بررسی اختصاصیت و حساسیت آنتی بادی های تولید شده بر علیه قطعه ی انتخابی از bap، تمامی سرم ها جمع آوری شده و در تست الایزاهای غیر مستقیم مورد استفاده قرار گرفتند. در نهایت به عنوان نتیجه، اختصاصیت آنتی بادی های تولید شده بر علیه ناحیه ی انتخابی از bap تایید شده و میزان حساسیت آن برای سیستم ایمنی در غلظت های بالای سرم، خوب ارزیابی گردید.