نام پژوهشگر: عفت غلامرضاپورطرقی

بررسی رفتار سلول های بنیادی مزانشیمی کشت شده در داربست طبیعی حاصل از بافت کلیه موش سوری در حضور هیالورونیک اسید
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه فردوسی مشهد - دانشکده علوم 1391
  عفت غلامرضاپورطرقی   مریم مقدم متین

مقدمه: ویژگی های زیستی هیالورونیک اسید (ha) آن را به ترکیبی مناسب برای استفاده در مهندسی بافت تبدیل نموده است. در این تحقیق از بافت کلیه سلول زدایی شده موش سوری به عنوان یک داربست طبیعی استفاده شده و اثر همزمان این داربست طبیعی و هیالورونیک اسید بر رفتار سلول های بنیادی مزانشیمی مشتق از بافت چربی انسانی مورد بررسی قرار گرفت. مواد و روش ها: پس از برداشت کلیه ها از موش سوری نر، ترکیبی از روش های فیزیکی و شیمیایی سلول زدایی شامل انجماد و ذوب سریع و تیمار با سدیم دودسیل سولفات (sds) 1? به کار گرفته شد. بعد از تایید سلول زدایی، مراحل شستشو و آغشته سازی داربست ها به هیالورونیک اسید انجام گرفت. داربست ها به دو گروه کنترل و آزمون تقسیم شدند: در گروه آزمون داربست ها به مدت 24 ساعت با ha3/0% (غلظت3 میلی گرم بر میلی لیتر) آغشته گردیدند. سپس حدود 105×3 سلول بنیادی مزانشیمی بافت چربی انسانی (ad-mscs) بر روی هر کلیه سلول زدایی شده کشت شده و در نهایت، مطالعات بافت شناسی جهت بررسی چسبندگی و مهاجرت ad-mscs به داربست، در روز های 5، 10، 15، 20 و 25 پس از کشت انجام گرفت. نتایج: مطالعات بافت شناسی، انجام سلول زدایی کامل با استفاده از sds1? به مدت 48 ساعت را تایید نمود. مطالعه داربست ها پس از کشت باad-mscs ، مهاجرت سلول ها به اطراف نواحی باقیمانده گلومرول ها و تشکیل ساختار هایی شبیه اپیتلیوم و همچنین تکثیر سلولی را نشان داد. بررسی داربست ها در روزهای 5، 10، 15، 20 و 25 در هر دو گروه افزایش تراکم، نفوذ و مهاجرت سلولی را در روزهای 10 و 15 نشان داد، در حالیکه کاهش تراکم سلولی در روزهای 20 و 25 مشاهده گردید. در میزان تراکم سلولی بین داربست های آغشته بهha و داربست های بدون ha تفاوت محسوسی مشاهده نشد، اما افزایش معناداری در میزان نفوذ سلول ها در روز پانزدهم کشت، در گروه آغشته به ha در مقایسه با گروه فاقد ha مشاهده گردید. نتیجه گیری: با توجه به نتایج، داربست حاصل از سلول زدایی کلیه می تواند دارای اثر القایی بر رفتارهای سلولی مانند چسبندگی، مهاجرت و تکثیر سلولی باشد. علاوه بر این ha در غلظت استفاده شده، می تواند بر میزان نفوذ سلول ها تاثیر گذار باشد.