نام پژوهشگر: حسین مجتهدی فر

بررسی پیش تیمار حرارتی جنینی و لاروی بر بروز ‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍‍ژنی پروتئین های شوک حرارتی (hsps) و تحمل گرمایی هیبریدهای کرم ابریشم
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه گیلان - دانشکده علوم کشاورزی 1391
  حسین مجتهدی فر   سید حسین حسینی مقدم

پیش تیمار حرارتی سبب افزایش سطح تحمل موجودات در مواجهه با شوک بعدی می شود، لذا می تواند میزان بروز پروتئین های شوک حرارتی (hsps) را نیز تحت تأثیر قرار دهد. در این تحقیق سطوح mrna ژن های shsp19.9، shsp20.4 و shsp21.4 پس از تیمارهای حرارتی در دو هیبرید کرم ابریشم با روش qrt-pcr کمیت سنجی شدند. پس از اعمال تیمارهای حرارتی یک بار شوک و دو بار شوک بر روی هیبریدهای 107×110 و 103×104، بافت چربی لاروهای سن پنجم در زمان های صفر، دو، چهار و 24 ساعت جداسازی، rna کل آن ها استخراج و پس از تبدیل شدن به cdna با روش real-time pcr بروز ژن پروتئین های شوک حرارتی کرم ابریشم اندازه گیری شدند. میزان بیان ژن های هدف نسبت به ژن مرجع rpl27a و نمونه های شاهد (بدون شوک) کمی سازی شدند. اندازه گیری های بروز ژنی نشان داد که shsp20.4 و shsp19.9 در کرم ابریشم تحت تاثیر تنش حرارتی بروز افزایشی داشته اما ژن shsp21.4 بروز کاهشی نشان داد. در بین ژن های مورد بررسی ژن shsp19.9 بیشترین میزان بروز را دارا بود اما با ژن shsp20.4 اختلاف معنی داری نداشت و کمترین بروز ژنی مربوط به ژن shsp21.4 بود (0001/0>p). همچنین هیبرید 103×104 بروز بیشتری نسبت به هیبرید 107×110 نشان داد (0001/0>p). تجزیه آماری تفاوت معنی دار بروز shspها را در دو تیمار حرارتی مشخص کرد به طوری که تیمار دوبار شوک حرارتی بروز ژن کمتری نسبت به تیمارهای یک بار شوک حرارتی داشت. اختلاف بین دو تیمار حرارتی در هیبرید 103×104 بیشتر مشاهده شد که نشان دهنده تاثیر بالای پیش تیمار حرارتی در این هیبرید است (0001/0>p). این تحقیق نشان داد که پیش تیمار حرارتی در تمامی ژن ها و هیبریدهای مورد بررسی باعث کاهش بروز ژنی شد و احتمالاً باعث القای تحمل حرارتی در کرم ابریشم می شود.