نام پژوهشگر: مریم طالبی گرکانی

جداسازی و شناسایی جدایه های بومی قارچ m.anisopliae توسط روش های مورفولوژیکی و بررسی ژن های pr1a, chi1و chi3
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - دانشکده کشاورزی 1392
  مریم طالبی گرکانی   حسن سلیمی

نتایج : با استفاده از روش های مورفولوژیکی 18 جدایه از قارچ متاریزیوم جداسازی شد. این جدایه ها برای مراحل بعدی تحقیق در محیط pda کشت داده و نگهداری شدند. پس از بررسی نتایج pcr مشخص شد که تمامی سویه های بومی دارای این سه ژن اصلی می باشند.اما تعدادی از سویه ها مخصوصا m4 قدرت بیماریزایی بالاتری نسبت به بقیه سویه ها داشتند به نظر می رسد که بیان موثر این ژن ها دراین سویه ها باعث ایجاد قدرت بیماریزایی بالاتری نسبت به بقیه سویه قارچ متاریزیوم آنیزوپلیه یکی از عوامل بیماری زای آفت های گیاهی مختلف مانند شته ها، ملخ ها، سوسک و ... می باشد. از آن جائیکه کاربرد روزافزون مصرف سموم شیمیایی باعث ایجاد نسل های مقاوم آفت ها و عوارض زیست محیطی می شود, استفاده از یک عامل بیوکنترل زیستی بسیار لازم به نظر می رسد. مواد و روش ها : نمونه ها از مناطق جغرافیایی متنوع جمع آوری شدند. برای جداسازی قارچ های مورد نظر از شته ها و حشرات آلوده به قارچ و نیز از خاک ریزوسفر نمونه گیری شد. از نمونه ها سوسپانسیون تهیه و در محیط کشت عمومی قارچ یعنی pda کشت داده شد. سپس از روش های پورپلیت (pour plate), کشت به صورت پخش کردن در سطح محیط(spread), کشت مستقیم و کشت خاک (soil culture) برای جداسازی متاریزیوم آنیزوپلیه استفاده شد. شناسایی اولیه بر اساس ویژگی های مورفولوژیکی کلنی ها از جمله شکل و رنگ آن ها انجام شد. جهت بررسی وجود ژن های chi1، chi3 و pr1a با استفاده از پرایمرهای طراحی شده توسط نرم افزار primer3 بر روی dna استخراج شده از قارچ های جدا شده pcr انجام شد. وجود یا عدم وجود توسط الکتروفورز محصولات pcr و سپس مشاهده باندهای اختصاصی در uv transilluminator ارزیابی شد. ها می باشد. کلید واژه : کنترل بیولوژیک، متاریزیوم آنیزوپلیه، ژن های chi1، chi3 و pr1a