نام پژوهشگر: الهام اصغری ادیب

بررسی تولید همزمان آمیلاز و پروتئاز توسط باسیلوس لیکنیفورمیس
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1391
  الهام اصغری ادیب   مهوش خدابنده

در جهانی که آنزیم ها در لیست تقاضای بسیاری از صنایع قرار دارند، توانایی تولید همزمان دو نوع از پرمتقاضی-ترین این آنزیم ها، پروتئاز و آمیلاز، با استفاده از سویه-های وحشی و بهینه سازی تولید آن ها با استفاده از محیط پیچیده اقتصادی، می تواند تأثیر شگرفی در صنایع ما داشته باشد. گزارشات اندکی مبنی بر تولید و تعیین ویژگی آمیلاز و پروتئاز که به طور همزمان توسط یک سویه تولید شده باشند، وجود دارد. در این طرح، باسیلوس لیکنیفورمیس accession number: fn678352 glu113، سویه ای بومی که از مناطق صنعتی در ایران جدا شده بود، برای تولید آمیلاز و پروتئاز انتخاب شد. انواع مختلفی از ترکیبات پیچیده و کم هزینه مثل پودر آب پنیر، سبوس گندم، آب ذرت، و آب ماست به عنوان منابع کربن و نیتروژن استفاده شدند. عوامل موثر بر فعالیت این دو آنزیم، با استفاده از تکنیک تغییر یک فاکتور در هر آزمایش مورد بررسی قرار گرفت و فعالیت قابل توجهی در حضور سبوس گندم و آب ماست مشاهده شد. بهینه سازی فعالیت آنزیم ها با استفاده از روش آماری تاگوچی نشان داد که تولید بهینه پروتئاز و آمیلاز، در ساعت 36 ام و هر یک تحت شرایط کشت مشخص و مجزا عبارت بودند از 41/12 ±u/ml 06/622 و 39/0 ±u/ml01/38.چون در روش تاگوچی دو شرایط مختلف در تولید بهینه آمیلاز و پروتئاز بدست آمد، آزمایشی طراحی شد که در آن تولید هر دو آنزیم همزمان و بهینه و به ترتیب معادل 64/17± u/ml 410/544و 416/0 ±u/ml 91/32بود. در این شرایط بهینه، دما برابر با 40 درجه سانتیگراد، 6 ph، سبوس گندم % 7/0 و مقدار آب ماست ml 5 بود. در نهایت این مطالعه نشان داد که سویه بومیباسیلوس لیکنیفورمیس glu113، توانایی تولید همزمان دو آنزیم مهم صنعتی، پروتئاز و آمیلاز را دارا می باشد. بیشینه تولید این آنزیم ها در حضور محیط کم هزینه حاوی محصولات جانبی کشاورزی چون سبوس گندم و آب ماست بدست آمد. نتایج حاصل از این تحقیق، برای صنایع نظیر مواد شوینده از اهمیت زیادی برخوردار است.