نام پژوهشگر: سهیلا بلندنظر

مطالعه ی بیوشیمیایی عوامل موثر بر اتصال پروتئینی ارلوتینیب به آلبومین سرم انسانی
پایان نامه دانشگاه تربیت معلم - تهران - دانشکده زیست شناسی 1391
  سهیلا بلندنظر   پروین ذاکری میلانی

میزان تاثیر دارو روی اندام هدف بستگی به غلظت داروی آزاد دارد که به درجه‏ی اتصال دارو با پروتئین‏های پلاسمایی وابسته است. اتصال دارو به این پروتئین‏ها تاثیر زیادی بر فعالیت بیولوژیک، متابولیسم، توزیع، سرعت دفع و سمیت دارو در بدن دارد. از آنجایی که پروتئین آلبومین، عمدتا مسئول اتصالات پروتئینی داروهایی با خصلت خنثی و اسیدی می‏باشد، در این پژوهش، آلبومین سرم انسانی (hsa) جهت مطالعه‏ی اتصال پروتئینی داروی جدید ارلوتینیب با خاصیت ضد‏سرطانی جهت درمان سرطان‏هایی چون ریه و پانکراس استفاده شده و میزان تاثیر فاکتورهای ph، دما و غلظت آلبومین در این اتصالات مورد بررسی قرار گرفت. روش مدنظر جهت بررسی اتصال دارو به پروتئین، دیالیزتعادلی بود اما با توجه به نتایج اولیه بدست آمده که اشاره به وقت‏گیر بودن این روش جهت بررسی اتصال پروتئینی ارلوتینیب داشت، روش اولترافیلتراسیون جایگزین این روش شد؛ همچنین جهت انداره‏گیری غلظت داروی آزاد در این بررسی از hplc استفاده گردید. در این بررسی، ابتدا غلظت‏هایg/ml µ32/0 تا 10 از ارلوتینیب تهیه و به‏طور جداگانه با آلبومین انسانی با غلظت g/ml04/0 به مدت 1 ساعت در داخل ویال شیشه‏ای ریخته شد تا اتصال پروتئینی در شرایط 3/7 ph، دمای 37 درجه‏ی سانتی‏گراد و آلبومین 4%، بین دارو و پروتئین کامل شود. سپس داروی آزاد با روش اولترافیلتراسیون جداسازی و غلظت آن به کمک دستگاه hplc سنجیده شد. جهت بررسی تاثیر فاکتورهای فوق الذکر، این آزمایش‏ها در ph های 8/6 و 8/7، و نیز دماهای 20 و 50 درجه‏ی سانتی‏گراد و همچنین غلظت آلبومین g/ml02/0، به صورت جداگانه انجام گرفت. در انتها تمامی پارامترهای مذبور توسط نمودارهای اسکاچارد و کلوتز مورد ارزیابی قرار گرفتند؛ اما به دلیل بروز شیب مثبت در منحنی‏های اسکاچارد، که خلاف اغلب گزارش‏های موجود در مطالعات مشابه بود و نیز با توجه به منابع محدود و موثق، که طیف غلظت دارو را به‏عنوان عاملی جهت ایجاد اسکاچارد مثبت معرفی کرده بودند، تمامی آزمایشات فوق دوباره با غلظت‏های g/mlµ20 تا 50 ارلوتینیب مورد بررسی قرار گرفت که نتایج متقنی به دست آمد.