نام پژوهشگر: سپیده پورقاسمی فتیده

کلون نمودن ژن مسئول ترشح پروتئین ماژور آنتی ژن سطحی 85b مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در اشیرشیاکلی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زابل - دانشکده علوم 1393
  سپیده پورقاسمی فتیده   فاطمه حدادی

واکسن bcg موجود در ایران یک واکسن زنده ضعیف شده است که با تضعیف میکروارگانیسم ها تهیه شده و قدرت بیماری زایی پاتوزن کاهش یافته است. اما آنتی ژن های عمل کننده به جهت ایجاد ایمنی در آن باقی می مانند. واکسن bcg از کشت مداوم مایکوباکتریوم بوویس که به مدت ?? سال در محیط صفراوی کشت داده شده (????- ???? ) تهیه می شود. این واکسن اثرات حفاظتی در مقابل توبرکلوزیس یا tb دارد. اما مخاطرات و موانعی نظیر بروز مننژیت سلی بدنبال تزریق واکسن در برخی از نوزادان و همچنین منع استفاده در مبتلایان به نقص سیستم ایمنی واکسن وجود دارد. از نظر تئوری ژن های کد کننده هر پروتئین را می توان به وسیله تکنیک های نوترکیب در باکتری ها ،مخمرها، و یا سلول های پستانداران تکثیر و بیان نمود. تعدادی از ژن های کد کننده آنتی ژن های سطحی ویروس ها و باکتری ها و پاتوژن های تک یاخته ای به طور موفقیت آمیزی در واسطه های بیانی تکثیر و بیان شده و از محصولات آنها به عنوان واکسن برعلیه بیماری های خاص استفاده شده است . در این راستا پروتئین ماژور30 کیلودالتونی(ag 85b) که در مایکوباکتریوم توبرکلوزیسوجود دارد بعنوان اولین انتخاب برای ساخت واکسن سل شناخته می شود . این آنتی ژن ترشحی توانایی تحریک پاسخ ایمنی پیشگیری کننده و همچنین تعدیل تولیدinf-? در مدلهای حیوانی داشت. هدف از این مطالعه جداسازی ژن کد کننده آنتی ژن سطحی 85b از مایکوباکتریوم توبرکلوزیس سویه h37rv و کلون نمودن ژن کد کننده آنتی ژن سطحی 85b و انتقال به یک پلاسمید بدون هیچگونه تغییر در ساختار نوکلئوتیدی آن بود. ژن مسئول ترشح این پروتئین در پلاسمید pcambia 1305.2 کلون شد. برای تولید آنتی ژن 85b نوترکیب ابتدا ژن fbpb توسط فرایند pcr تکثیر شده و پس از کلون نمودن به باکتری e.coli سویه dh5? منتقل شد .