نام پژوهشگر: ساسان جهانشاهی

تجزیه زیستی بیس فنل a در محیط شور بوسیله باکتری های بومی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1393
  ساسان جهانشاهی   مهوش خدابنده شهرکی

هیدروکربن های آروماتیک چند حلقه ای (pahs) آلودگی های رایج زیست محیطی هستند که توسط فعالیت های بشری و منابع طبیعی ایجاد می گردند. با این وجود سازمان بهداشت جهانی (who) بزرگترین منشا pahها را فرایند های صنعتی و سایر فعالیت های انسانی می داند. این ترکیبات به دلیل توان بالای سمیت، جهش زایی و سرطان زایی موجب نگرانی های عمده ای شده و در فهرست آلاینده های درجه اول آژانس حفاظت محیط زیست آمریکا (us epa) و اتحادیه اروپا (eu) قرار گرفته اند. هدف این تحقیق زیست پالایی بیس فنلa به عنوان یک هیدروکربن آروماتیک چند حلقه ای در نظر گرفته شد. ابتدا از 5 منطقه صنعتی ( آلوده به ترکیبات آروماتیک ) و شور، تحت شرایط استاندارد نمونه برداری شد. غربالگری طی 2 مرحله انجام شد. طی غربالگری اولیه از مناطق نمونه برداری شده، 8 جدایه حاصل گردید. جدایه های حاصل از غربالگری اولیه و همچنین جدایه هایی با سابقه تجزیه ترکیبات آروماتیک و نمک دوست تحت غربالگری ثانویه قرار گرفتند. طی غربالگری ثانویه یک جدایه (جدایه نمونه پساب پتروشیمی ماهشهر) به عنوان جدایه برتر انتخاب شد. این جدایه قادر به رشد در محیط معدنی نمکی حاوی mg/l 300 بیس فنلa (به عنوان تنها منبع کربن و انرژی) در حضور g/l nacl 40 می باشد. نتایج توالی یابی قطعه 16s rrna نشان داد که جدایه برتر بیشترین شباهت (99%) را با سودموناس چنگدونسیس سویه mbr دارد، از این رو جدایه برتر سودوموناس سویه ykj نام گذاری شد. سویه ykj قادر به رشد در تمام دماهای مورد مطالعه (25 تا 40 درجه سانتی گراد) بوده و طیف ph قابل تحمل این جدایه، 9-6 است و شرایط مناسب رشد ?c 30t= و 7 ph= تعیین گردید. مقدار cod محیط کشت از مقدار اولیه o2/l mg 2/655 بعد از گذشت 36 ساعت در حضور سویه ykj به o2/l mg 2/109 کاهش یافت و پس از این مدت، مقدار cod تا 48 ساعت تقریبا ثابت ماند. آنالیزهای انجام شده با دستگاه hplc نشان داد طی 48 ساعت علاوه بر مصرف کامل بیس فنلa، تمامی متابولیت های حاصل طی تجزیه زیستی بیس فنلa بوسیله سویه ykj، تجزیه شده و تنها یک متابولیت در محیط قابل رویت است. سویه ykj نسبت به آنتی بیوتیک کلرامفنیکل مقاوم می باشد، همچنین مقاومت نسبی به آمپی سیلین داشته، ولی نسبت به آنتی بیوتیک های ریفامپیسین، کانامایسین و تتراسایکلین حساس می باشد. با توجه به نتایج کسب شده با دستگاه های hplc و gc-ms که در مجموع منجر به شناسایی هفت متابولیت (طی تجزیه زیستی بیس فنلa) شد، مسیری به عنوان مسیر متابولیکی تجزیه بیس فنلa در سویه ykj پیشنهاد گردید که مطابق با مسیر متابولیکی گزارش شده در پایگاه اطلاعاتی kegg است.