بررسی سینتیک بازدارندگی جک بین اوره آز توسط عصاره های گیاهی

مطالعه بر روی هلیکوباکتر پیلوری به عنوان یکی از عوامل مهم در پیشر ت سرطان معده و همچنین مطالعه آنزیم اوره آز در حمایت از این باکتری در محیط اسیدی معده از دیرباز تاکنون انجام پذیرفته است. اوره آز (اوره آمیدوهیدرولاز)متالوآنزیم وابسته به اتم نیکل است که اوره را با سرعتی زیاد هیدرولیز کرده و منجر به تولید دو مولکول آمونیاک و یک مولکول دی اکسید کربن میشود. روشهای متعددی برای سنجش مقدار محصول تولید شده در طول واکنش و همچنین تخمین فعالیت اوره آز در دسترس است. آمونیاک با روشهای مختلفی سنجش میشود مانند: الکترودهای یون-گزین، واکنش با فنول-هیپوکلریت و یا معرفهای نسلر. اساس روشهای ذکر شده بر پایه قلیایی شدن محیط واکنش در حین انجام واکنش میباشد. اوره آز هم در صنعت کشاورزی و هم پزشکی نقش مهمی را از خود نشان میدهد. در پزشکی اوره آزهای باکتریایی منجر به بیماریهای کبدی، زخم معده و سنگهای کلیه میشوند. در صنعت کشاورزی فعالیت زیاد اوره آز در خاکهای کشاورزی باعث مشکلات زیست محیطی و اقتصادی از طریق آزاد سازی غیرطبیعی آمونیاک به اتمسفر میشود. این امر منجر به تخریب گیاهان ابتدا از طریق محروم ماندن گیاه از مواد مغذی و ثانیا تولید و پخش آمونیاک سمی در میان آدمها میشود. جلوگیری از فعالیت آنزیم اوره آز نقش گسترده ای هم در صنعت پزشکی و کشاورزی و هم در یادگیری سینتیک آنزیم داشته است. این مهارسازی در کاهش از دست ر فتن نیتروژن موجود در اوره به صورت آمونیاک فرار موثر بوده است. همچنین مهارکننده ها میتوانند کریستال های تجمع یافته در کلیه را در خود حل کرده و از تشکیل کریستالهای جدید در ادرار جلوگیری کنند. در این پژوهش با انتخاب سه ترکیب فلاونیدی کوئرستین، کاتچین و نارینژین به عنوان مهارکننده به بررسی سینتیک مهارسازی فعالیت اوره آز پرداخته شده است. همچنین با انتخاب شش گیاه با خاصیت دارویی و درمانی به صورت عصارهای متانولی به بررسی قدرت مهارکنندگی هر یک نیز پرداخته شده است. مهارسازی آنزیم اوره آز با استفاده از متد ایندو فنول که به وسیله ی ویتربرن به اثبات رسیده است صورت پذیرفت. پتانسیل بازدارندگی با استفاده از تکنیک اسپکتروسکوپی ماورای بنفش- مرئی در طول موج 625 نانومتر اندازه گیری شد.