نام پژوهشگر: محمد صادق ندیمی فر

بررسی اندرکنش آنزیم تایروزیناز و پروتیین لکتین در قارچ خوراکی agaricus bisporus
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - پژوهشگاه ملی مهندسی ژنتیک وزیست فناوری 1392
  محمد صادق ندیمی فر   کمال الدین حق بین

قارچ خوراکی منبعی غنی از پروتئین¬های لکتین و تایروزیناز می¬باشد. لکتین¬ها، پروتئین¬هایی غیرآنزیمی هستند که به طور اختصاصی و برگشت پذیر به بخش های کربوهیدراتی گلیکوپروتئین ها و گلیکولیپیدها، بدون این که ساختار کووالان لیگاند های گلیکوزیله را تغییر دهند، متصل می شوند. کاربرد لکتین ها در بیوحسگرها، تشخیص های اختصاصی، تخلیص ترکیبات قندی و مطالعات بیوشیمیایی قندها می¬باشد. تایروزیناز یک پلی فنول اکسیداز می¬یاشد. این آنزیم یکی از مهمترین آنزیم های مسیر سنتز ترکیبات پلی فنلی و ملانین است. اهمیت بالینی این آنزیم در سنتز ملانین و نقش آن در بیماری ویتلیگو می¬باشد. در صنعت نیز به عنوان آنزیم اصلی در مسیر تولید داروی l-dopa می¬باشد. با توجه به تحقیقات گذشته نشان داده شده که تایروزیناز و لکتین بواسطه داشتن اندرکنش با یکدیگر در طی فرایند تخلیص از یکدیگر تفکیک¬پذیر نبودند. در این مطالعه سعی بر این شد که با تغییر و بهبود شرایط حاکم بر مراحل استخراج، استفاده از حلال آلی جهت شستشو و رسوب¬دهی مرحله¬ای و در نهایت انتخاب ستون کروماتوگرافی مناسب شرایط لازم برای کاهش اندرکنش و تفکیک این دو پروتئین ایجاد شود. در نهایت نشان داده شد که ستون کروماتوگرافی غربالی سفادکس g-100 بهترین قدرت تفکیکی برای پروتئین-های حاصل از شستشوی متانولی و رسوب¬دهی دو مرحله¬ای توسط استن را دارا می¬باشد. همچنین با توجه به شواهد موجود بر اندرکنش این دو پروتئین، مطالعه¬ای قیاسی جهت بررسی میزان اثرگذاری لکتین بر کاهش نیروی هیدروالکترواستاتیک وارد بر آنزیم تایروزیناز و نتیجتاً میزان پایداری فعالیت تایروزیناز صورت گرفت که نشان دهنده تاثیر مثبت حضور لکتین بود.