نام پژوهشگر: غلامرضا خمیسی پور

تولید سلولهای رده هماتوپوئتیک انسانی ازفیبروبلاست های القا شده با وکتور آدنوویروسی حامل ژنهای فعال دوره رویانی
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه تربیت مدرس - دانشکده علوم پزشکی 1390
  غلامرضا خمیسی پور   علی اکبر پورفتح اله

در سال های اخیر ، دانشمندان سلولهای سوماتیک را به سلولهای شبه جنینی بنام سلولهای پرتوان القایی(ips) بازبرنامه ریزی کرده اند.با توجه به ادغام ژنومی وکتورهای لنتی یا رتروویروسی،و عوارض زیان آور متعاقب این ویروسها،تحقیقات فعلی بر بکارگیری ابزارهای بی خطر تر انتقال ژن معطوف شده است.آدنوویروسها ابزارهای مطمئنی برای انتقال وبیان ژن در سلولهای یوکاریوتی بشمار میروند.در این مطالعه، ما آدنووکتورهای حامل ژنهای انسانی فعال در دوره رویانی را ساخته واین آدنووکتورهای نوترکیب را با هدف تولید وکتورهای انتقال دهنده مطمئن تر بعنوان ویروسهای غیر ادغام شونده برای انجام بازبرنامه ریزی تولید کردیم.cdna های چهار ژن cmyc، klf4،oct4، و sox2 تکثیر یافته و سپس بطور جداگانه در وکتور انتقالی cmv-ires-gfpکلون شدند.وکتور انتقالی خطی شده با pme1 بطور همزمان با وکتور padenovator ?e1/e3در سلولهای rec+ bj5183 ترانسفورم شدند.تولید آدنوویروسها با ترانس فکت کردن آدنووکتورهای خطی شده با pac1 در رده سلولی 293a صورت گرفت.بازدهی ترانس فکشن از طریق مشاهده بیان gfp در زیر میکروسکپ فلورسانس تعیین شد.با توجه به پاره ای محدودیت ها در بکارگیری لنتی یا رتروویروسها وبازدهی پایین بازبرنامه ریزی سلولهای انسانی با وکتورهای حامل ژنهای موشی، اعتقاد داریم آدنووکتورهای حامل ژنهای انسانی بهترین گزینه برای بازبرنامه ریزی سلولهای سوماتیک و تولید سلولهای بنیادی پرتوان القایی هستند.بمنظور تولید سلولهای بنیادی هماتوپوئتیک،در ابتدا،فیبروبلاست های جداشده از پوست ختنه گاه تکثیر وآدنوویروسهای نوترکیب حامل ژنهای رویانی به محیط کشت اضافه گردید.پس از تشکیل کلون های شبه جنینی(adeno-ips) ،و تکثیر سلولی، سلولها به محیط کشت بدون bfgf منتقل شدند تا اجسام شبه جنینی تشکیل شوند.سپس به محیط تمایزی با وبدون سلولهای استرومایی بمدت 14 روز کشت داده شدند.یافته های حاصل از بررسی بیان ژن cd34 و شاخص های آنتی ژنی cd34,cd38 و cd133 نشان دادند که میزان تمایز هماتوپوئتیک سلولهای ips در محیط استرومایی وبدون استفاده از سایتوکاین موفق به تمایز سلولهای ips به سولهای تمایزیافته هماتوپوئتیک شدیم.

مقایسه بیان ژنهای sox2,klf4,oct4 و c-myc در سلولهای بنیادی مشتق از چربی و سلولهای بنیادی پرتوان القایی
پایان نامه 0 1391
  ندا کاظمی مقدم   طاهره فروتن

یکی از انواع سلولهای بنیادی بالغ سلولهای بنیادی بدست آمده از بافت چربی می باشد. این سلولها در مقایسه با دیگر انواع سلولهای بنیادی بالغ پتانسیل بالاتری برای خودتجدیدی (self renewal) و همچنین متمایز شدن به انواع مختلفی از سلولها از جمله آدیپوسیت ها،میوسیت ها،استئوبلاست ها و کندروسیتها را از خود نشان می دهند. از سوی دیگر دوباره برنامه ریزی سلولهای مشتق از چربی از کارآمدی بیشتری نسبت به فیبروبلاست های انسان و موش (که بیشترین نوع سل لاین مورد استفاده برای تولید ips است.) نشان دادهاست. مطالعه دیگری نشان داده است که ساولهایips مشتق از چربی بیشتر از بقیه سلولهای خصوصیات و مورفولوژی های سلولهای بنیادی جنینی را نشان می دهند. لذا در این مطالعه بر آن شدیم که میزان بیان این4 فاکتور رونویسی مهم oct4, c-myc, klf4و sox2 را در دو منبع ips و سلولهای بنیادی چربی مورد مقایسه قرار دهیم. سلول های بنیادی می توانند به عنوان سلول های "اولیه" تعریف شوند که توانایی تمایز به انواع مختلفی از بافتها را پس از القا دارند. این سلول ها می توانند عملکرد را به بافت آسیب دیده با القای رشد به بافت جدیدی که برای عملکرد از دست رفته تخصصی شده است بازگردانند. سلول های بنیادی پتانسیل ویژه و مهمی را در درمانهای طب رژنراتیو دارند ، توانایی بازگردانی عملکرد به بافت تخریب شده یک امتیاز بسیار ارزشمند به شمار می رود.هدف این درمانهای رژنراتیو می تواند بوسیله سلول های بنیادی به تحقق بپیوندد.برای کاربردی کردن این پدیده باید از جنبه های مختلفی نظیر خلوص، کافی و کارآمد بودن ، مقرون به صرفه بودن ، نیازمندی سلولی مورد بررسی قرار گیرد. سلول بنیادی درمانی (stem cell-therapy) با تمام این سدها روبرو شده است.فراوانی ، در دسترس بودن و خالص بودن ، کارآمد بودن و پیچیدگی تمایز از خصوصیات این سلول ها است که در جنبه درمانی این سلولها اثرگذار است. یکی از انواع سلولهای بنیادی که خصوصیات ویژه ای را به عنوان یک فاکتور خوب درمانی به خود اختصاص داده است سلولهای بنیادی مشتق از چربی می باشد که adsc نامیده می شوند.

بررسی تاثیر مهار mir-29a بر بیان ژن های مختص جنینی در سلول های لاین سرطان پستانmcf-7
پایان نامه وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه پیام نور - دانشگاه پیام نور استان تهران - پژوهشکده علوم زیستی 1394
  غلامعلی حیدری   سیما نصری

از آنجا که نقش ژن های مختص جنینی klf4 ، sox2 ،oct4 و c-myc در سلول های سرطانی هنوز به طور کامل شناسایی نشده است ، در این تحقیق اثر مهار mirr 29a بر بیان ژن های مختص جنینی در سلول های لاین سرطان پستان mcf-7 مورد مطالعه قرار گرفت .