ارزیابی بیان عوامل رشد عصبی و تکثیر سلولی در هم کشتی سلول های بنیادی مزانشیمی با سلول های بنیادی عصبی
چکیده
زمینه و هدف : هم کشتی سلول های بنیادی یکی از روش های مورد استفاده محققین علم سلول درمانی است. با این روش می توان باعث بهبود شرایط کشت و تمایز بهتر سلول های بنیادی شد. عوامل رشد عصبی، مولکول هایی هستند که نقش های بسیار حیاتی در بقاء، تکثیر و تمایز سلول های بنیادی دارند. این مطالعه به منظور ارزیابی بیان عوامل نوروتروفیک یا رشد عصبی و سرعت تکثیر سلول های بنیادی عصبی (neural stem cells: nscs) در هم کشتی این سلول ها با سلول های بنیادی مزانشیمی (mesenchymal stem cells: mscs) انجام شد. روش بررسی : این مطالعه تجربی روی 40 سر موش صحرایی بالغ نژاد ویستار در دانشکده زیست شناسی دانشگاه دامغان انجام شد. سلول های nsc و msc از موش های صحرایی استخراج شدند. برای جداسازی nscs ، ناحیه شکنج دندانه ای هیپوکامپ برداشته شد. پس از هضم مکانیکی و آنزیمی، توده سلولی در محیط dmem/f12 حاوی fbs کشت داده شد. برای جداکردن mscs مغز استخوان، استخوان های فمور و تیبیا تخلیه و در محیط فوق الذکر کشت داده شد. هم کشتی nscs با mscs در ظرف ترانس ول و در محیط dmem/f12 حاوی fbs انجام شد. تعیین هویت سلولی، سرعت تکثیر و نیز بیان عوامل نوروتروفیک (cntf, bdnf, gdnf, nt-3) به ترتیب با روش های ایمنوسیتوشیمی، هموسایتومتر و rt-pcr انجام گردید. یافته ها : مقایسه نیمه کمی بیان عوامل نوروتروفیک بین گروه های nsc هم کشتی و nscs که به تنهایی (کنترل) کشت شده بود؛ تفاوتی نشان نداد؛ ولی نتایج نشان داد که الگوی بیان ntfs (neurotrophins) در nscs و mscs مشابه یکدیگر هستند. تکثیر nscs در شرایط هم کشتی به طور معنی داری افزایش یافت (p<0.05).